双子表面活性剂存在下孔雀石绿与DNA作用的共振光散射研讨.pdfVIP

双子表面活性剂存在下孔雀石绿与DNA作用的共振光散射研究 郭祥峰 贾丽华王清滨 胡廷峰 曾晓丹 (齐齐哈尔大学化学与化学工程学院161006) 摘要用二甲基十二烷基胺与双氯乙酰乙二胺反应合成了新型双子阳离子表面活性剂 双氯化N，N’一双(2一十二烷基二甲基氨基)一乙酰基一乙二胺(M1)，利用IR和NMR进 llm、385nm、476 llm处的RLS强度与 llm处产生了增强的共振光散射(RLS)峰。在385 DNA含量之间呈线性关系，线性范围分别为ctDNA：0—4．80 I山g／mL，hsDNA：0一O．70 lxg／mL，yRNA：O～1．70l山g／mL，检测限分别为：47．2ng／mL、35．4ng／mL、30．3ng／mL。线性 范围和检测限均优于相同疏水链的传统表面活性剂十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)，使用 量比DTAB小3个数量级。测定了4个合成样，回收率在99．5％～104．0％之间。 关键词DNA，孔雀石绿，双子表面活性剂，RLs 1 引言 双子表面活性剂是近年来表面活性剂领域研究的热点之一【1】。它的独特结构使其具有传统表面活 性剂所无法比拟的性质，其商业价值更是引起了广泛的关注心】。 核酸作为重要的遗传物质，其研究已成为生命科学的重要内容【3】，核酸的定量测定是研究核酸的基 光度法、荧光法之后又一种新的高灵敏度的核酸测定方法HJ。 在已报道的文献中，均以传统表面活性剂作为敏化剂利用RLS技术测定DNA，而利用双子表面活性 剂作为敏化剂的研究尚未见报道。我们合成了新型双子表面活性剂双氯化N，N’一双(2一十二烷基二甲 面活性剂测定核酸的新方法。与相同疏水链的传统表面活性剂十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)进行了对 中核酸含量的测定，结果令人满意。 2实验部分 2．I仪器和试剂 试剂，使用前按文献方法精制。水为超纯水(比电阻为18．2Q)。 2．2实验 2．2．IMI的合成 将二甲基十二烷基胺与双氯乙酰乙二胺溶于一定量的异丙醇中，n(二甲基十二烷基胺)：n(双氯乙酰 乙二胺)=2．5：1，加热至回流。测定体系的胺值，当双氯乙酰乙二胺转化率达到98％时停止反应，减压 蒸馏除去溶剂。残留物用丙酮一CH：CI：混合溶剂重结晶，得白色晶体。 、CH3 【 凸H3 晶3 J M．I 1锄m(400 收率66．7％，mp221．3—222．4。C，Fr—IR((／cm。1)：1674，1568，1462。1HMHz，CDCl3，8)：9．38(s， —261— 一1．20(m，36H，CH2)，0．83(t，6H，J=6．0Hz，cH3)。BCNMR(103 38．51，31．90，29．58，29．45，29．41，29．32，29．04，27．84，26．18，22．80，22．56，14．00。 2．2．2测定方法 分别将ctDNA、hsDNA、yRNA缓慢溶于超纯水，在0—4。C下保存，准确浓度由260．0nm处吸光度确 定M。，操作液浓度分别为100．0斗g／mL、10．0lxg／mL和10．0bLg／mL。pH=6．0BR缓冲溶液，1．0×10—4 mol／L孔雀石绿(MG)溶液，1．0×10．-4mol／L双子表面活性剂(M1)溶液。 ^／nm Cyl04mol／mL 图1MI．MG．DNA作用fl勺RLS谱图 图2MI用量对RLS强度影响 1．MI-MG·ctDNA；2．MI：3．MG；4．DNA ctDN