反义STAT3寡脱氧核苷酸对恶性肿瘤增殖凋亡影响的研讨.pdfVIP

functionalis exchange—correlation PBE．Thelocalenvironmentof density the·OHintemlsofradialdistributio蒂 was in with func．tions theresultsfor analyzedcomparison water．Thesimulationfound·OHcanf．o兀11 pureliquid instantaneoustransientintermediatewiththe which form complexes waters，in both sever．al neighboring species bondsandO--‘O hemi of‘OH hydrogen bond．Furthermore，the fromthe process capturehydrogen neighboring watermolecules、~，asobservedinthesimulation． 反义STAT3寡脱氧核苷酸对恶性肿瘤增殖凋亡影响的研究 唐古生蔡建明倪瑾项莺松 第二军医大学海医系放射医学教研室上海200433 I摘要1：目的：探讨反义STAT3寡核苷酸对鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制和促凋亡作用。方法： 观察。用Annexin V／PI复染，流式细胞仪检测细胞凋亡百分率的变化。结果：B16细胞、人肝癌7721 殖受到明显抑制，细胞凋亡率增加。结论：B16及其它多种恶性肿瘤中STAT3蛋白高表达并且可检测到 磷酸化水平的增高。反义转染后B16细胞中STAT3蛋白的表达和磷酸化水平降低，细胞增殖受到明显抑 制，细胞的凋亡增加。STAT3可能成为一种新的肿瘤治疗的分子靶位。 关键词：反义STAT3 B16凋亡增殖抑制肿瘤治疗 TransducerandActivatorof STAT3(Signal Transcription3)是一种存在于细胞浆与酪氨酸磷酸化信 号通道相耦联的具有关键作用的的双功能蛋白，它通过特定位点的磷酸化而活化，调控着多种功能蛋白 究成为近年研究的热点。利用各种手段阻断STAT3信号通道后，多种肿瘤细胞均表现出明显的增殖抑制 或凋亡增加效应。而对几种正常细胞的研究表明阻断该通道后，正常细胞的生长并没有明显改变，表明 STAT3反义寡脱氧核苷酸转染鼠恶性黑色素瘤B16细胞株，研究其增殖和凋亡的变化情况。 1、材料和方法 1．1细胞的获取：鼠恶性黑色素瘤B16细胞株购自中国科学院上海生化与细胞所，用含10％胎牛血 素，于37℃、5％CO，饱和湿度下条件下培养，实验所用的细胞均处于指数生长期。 mM 1．2蛋白抽提：胞核胞浆蛋白分别抽提。胞浆蛋白抽提液：10 HEPES(PH7．8)，15mMKCI，10％N EDTA，lmMDTT，1mM IX PMSF，2．35u 5 P一40，0．1mM MgCl2，使用前加100g／ml g／mlaprotinin，and HEPES(7．9)，10mMKCI，lmM u p