毛竹“韧皮部结”发育过程中Ca2的超微细胞化学定位研究.pdfVIP

农业与林业 499 毛竹“韧皮部结”发育过程中Ca2+的超微细胞化学定位① 于 芬丁雨龙 南京林业大学竹类研究所，江苏省南京市，210037 摘 要 edulis 利用焦锑酸盐沉淀法，对中国重要的经济竹种毛竹[phyllostachys (Carr．)H．]节部“韧皮部结”发育过程中Ca2+的分布进行了研究，结果发现“韧皮部结”形 成期，Ca2+主要分布在细胞壁和胞间隙上。随着“韧皮部结”的发育，Ca2+逐渐向细胞质内 的液泡中转移，而细胞壁和胞闻隙上的Ca2+逐渐减少。到了发育期的后期，Ca2十主要分布 于液泡膜及其内含物上，液泡成为这个时期主要的钙库。在“韧皮部结”成熟的过程中，液 泡膜破裂，细胞质中Ca2+浓度大幅度增加，到“韧皮部结”成熟末期，细胞内的Ca2+浓度降 至较低水平。实验结果表明Ca2+启动了“韧皮部结”的分化，并且调节着“韧皮部结”的生理 功能。 关键词韧皮部结 发育Ca2+生理功能 竹秆节部对于竹子的生长发育具有非常重要的意义，“韧皮部结”是韧皮部在竹节部形成的一特殊 结构。目前对于“韧皮部结”的结构和发育已有相关报道(丁雨龙等，1995，2000)，但对于“韧皮部结”发 育过程中细胞化学的变化目前还没有研究。Ca2十是细胞生长发育过程中的第二信使，对植物的生长发 位研究，为“韧皮部结”发育生物学，以及揭示“韧皮部结”的生理功能提供细胞化学方面的依据。 一、材料与方法 节的节部；2、4、6年生的竹秆取中间节部，切成lmm3左右的小块。立即放人2％焦锑酸钾缓冲液配制 的3％戊二醛中4℃下固定，用2％焦锑酸钾的磷酸缓冲液洗涤，2％焦锑酸钾缓冲液配制的1％锇酸4C 下后固定，重蒸水洗涤，冰酒精梯度脱水，Epon812包埋，于LKB-V超薄切片机上切片，醋酸双氧铀染 二、观察结果 “韧皮部结”的发育过程分为三个主要时期：形成期、发育期和成熟期。 (一)形成期Ca2+的分布 在原形成层及“韧皮部结”形成期，细胞处于分化初期，Ca2+主要沉积在细胞壁和胞间隙上，细胞内 ①基金项目：国家自然科学基金资助项目，国家“十五”科技攻关项目(2004BA506BOI)。 第Ⅱ届博士生学术年会论文集 变为透明的空洞(图1，0J，征明沉积颗粒确为ca“。 一 工 ， 豫 c甲 目1 【“M＆8#“Ⅳ＆№目n【’a’*$nⅢ№镕自m月*r，×4000．zKGTA§o* DDoo MmM#1ica’∞*R^tq∞i*(∞m)xl (二)发育期(：矿1的分布 随着“研应部结”的进一步分化发育．细胞进^发育期。遮一阶段细胞譬上的ca’沉j}{颗粒逐渐变 21运输小泡，通过质膜内 ^，并呈团块状，分布忙置也开始向质膜转移靠近(罔2．1、2)，弗凡开始形茄i【、a 陷向细胞内运输(圈2，3)。分裂阶段“韧皮部结”细胞的小被泡开始逐渐融合成大液泡，液泡内出现膜 状物质以及吞噬的细胞质小泡，在液泡膜和液泡吞噬物I一都有cr‘的分布．戏卡6_悼上也有少世的ca2+ 沉积物(阿2，1)。 至分裂阶段束期进^伸长期时．细胞壁岍,口5111厚，中央大液泡已经形成细胞质和细胞核被挤至细 胞边缘。这个时期纳胞壁ECa”的沉秘减少，液泡膜及其内古物上的ca“沉#{增加(引2，4、5)。蹦着 细胞进一步分化，cr挑积的这种变化趋势进一步JJⅡ强。ca”沉积所在位置的质膜随后内陷，将ca” 运输到细胞的被泡内。对于ca2的转移