肺结核患者疱疹病毒感染的检测及意义探讨.docVIP

精品论文 参考文献 肺结核患者疱疹病毒感染的检测及意义探讨 湖南省邵阳市中心医院 421000 摘要：目的 探讨肺结核患者疱疹病毒感染的检测及临床意义。方法 选取我院收治45例肺结核患者作为观察组，同时选取38例正常健康人作为对照组，对两组患者均采用酶联免疫法检测血清中人巨细胞病毒（HCMV）及单纯孢疹病毒（HSVⅠ型、Ⅱ型）感染的IgM抗体，采用化学发光法检测血清中EB病毒VCA IgM抗体，再采用PCR-southern对两组患者外周血单个核细胞中EBV DNA表达进行检测。结果 观察组患者血清HCMV-IgM及HSV-IgM阳性率分别为20.0%，15.6%，对照组分别为5.3%，0%；两组比较差异明显Plt;0.05；观察组VCA-IgM阳性率为6.7%，对照组未检出VCA-IgM阳性，两组比较无明显差异，Pgt;0.05；观察组EBV DNA阳性率为33.3%，对照组为7.9%，两组比较差异具有统计学意义，Plt;0.01。结论 肺结核患者存在较高的HCMV、HSV及EBV活动性感染，疱疹病毒感染与肺结核患者病情有一定联系。 关键词：肺结核；疱疹病毒感染；检测 结核病对人类健康产生严重危害，结核病是一种慢性传染疾病。近年来，结核病的发病率明显升高。有研究表明，肺结核患者一般免疫功能较低，可能存在疱疹病毒活动性感染，加重了结核病患者病情[1]。疱疹病毒一般表现为潜伏感染，一旦患者免疫功能下降即可引发激活感染。为更好了解疱疹病毒对结核病病情的影响，本研究对我院收治的45例结核病患者的血清进行检测，重点检测HCMV-IgM及HSV-IgM（Ⅰ型、Ⅱ型）和EB病毒VCA-IgM及外周血单个核细胞中EBV-DNA。现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取我院呼吸科门诊于2014年7月-2015年4月间收治的肺结核患者45例，其中男25例，女20例，年龄18-79岁，平均年龄（47.4plusmn;2.1）岁。其中继发性肺结核38例，原发性肺结核7例。同时选取正常人38例，其中男27例，女11例，年龄17-78岁，平均（48.1plusmn;1.9）岁。两组患者在年龄、性别等方面比较无明显差异，Pgt;0.05，具有临床可比性。 1.2 方法 1.2.1 IgM抗体检测 分别采集观察组和对照组外周血，将血清分离，采用北京贝尔生物工程有限公司生产的酶联免疫法试剂盒对HCMV抗体（IgM）、HSV Ⅰ型、Ⅱ型抗体（IgM）进行检测，采用深圳市新产业生物工程有限公司生产的化学发光法试剂盒检测血清中EB病毒VCA IgM抗体，过程严格按照说明书进行，对阳性和可疑阳性标本进行重复检验。其中HSV的Ⅰ型、Ⅱ型IgM抗体只要有一种结果检测为阳性，即HSV-IgM判读为阳性。 1.2.2 EBV-DNA的检测 分别采集观察组和对照组外周静脉血，行EDTA抗凝，将PBMC分离，加入消化液中，56℃水浴，1h后将其煮沸，持续15min，12000r/min离心10min，提取上清液。采用EBV Bam H I-W区特异性引物和探针，检测提取细胞DNA，上游引物序列选为5rsquo;-CCAGACAGCAGCCAATTGTC-3，下游引物序列选为5rsquo;-GGTAGAAGACCCCCTCTTAC-3rsquo;，PCR反应体积为30mu;l，引物含量20pmol/L，Tag酶1.0U，dNTP83mu;mol/L。设立阴性对照和阳性对照，模板DNA 5mu;l，阴性对照组采用去离子水，94℃预变性，持续5min，再行以下循环30次：94℃持续1min，60℃持续2min，72℃持续3min，最后72℃持续5min，最后取10mu;l PCT以20g/L琼脂糖凝胶电泳，时间为45min，再给予溴化乙锭染色，于紫外线下进行观察。 1.3 观察指标 观察两组患者血清中HCMV及HSV感染的IgM及EB病毒VCA-IgM和外周血单个核细胞中EBV DNA表达，并作临床对比分析。 1.4 统计学方法 所有数据均采用SPSS13.0统计学软件处理，计数和计量资料分别采用X2检验和t检验，检验水准为sigma;=0.05。 2 结果 观察组HCMV-IgM阳性率为20.0%，对照组为5.3%，两组比较差异明显，Plt;0.05；观察组HSV-IgM阳性率为15.6%，对照组为0%，两组比较有显著差异，Plt;0.05；观察组VCA-IgM阳性率为6.7%，对照组未检出