第二章 原核微生物a.ppt

革兰氏阴性细菌的细胞壁 革兰氏阴性细菌 内壁层（肽聚糖层） 外膜 脂蛋白层 脂多糖层（LPS） O—抗原侧链 核心多糖 类脂A（内毒素的物质基础） 注：脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞外壁层的主要成分，也是革兰氏阴性细菌细胞壁中独有的成分。 外膜蛋白(outer membrane protein) 孔蛋白（porins）是由三个相同分子量（36000）蛋白亚基组成的 一种三聚体跨膜蛋白，中间有一直径约1nm的孔道，通过孔的开 、闭，可对进入外膜 层的物质进行选择。 非特异性孔蛋白 特异性孔蛋白 可通过分子量小于800~900 的任何亲水性分子 只容许一种或少数几种相关 物质通过，如维生素B12和核 苷酸等。 脂多糖（LPS）作用 类脂A是细菌致病物质——内毒素毒素的物质基础（只有在细胞死亡和裂解后才释放出来） 负电荷较强，与磷壁酸相似，也有吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用，对细胞膜结构起稳定作用 结构多变，使细菌抗原决定簇呈现多样性。（沙门氏菌2017种） 噬菌体吸附的受体 选择性吸收，如水、气体、嘌呤、嘧啶等。阻拦溶菌酶、青霉素、去垢剂大分子进入。 LPS需借助Ca维持，EDTA去Ca后，LPS解体，肽聚糖暴露，G-细菌就容易被酶破坏 3. 细胞壁的化学组成 革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较 革兰氏阳性 革兰氏阴性 厚度 厚 15-80nm 薄 10-15nm 肽聚糖 多 40%-95% 少 10%-20% 脂类 少 1%-4% 多 11%-22% 磷壁酸 有 无 外膜 无 有 脂蛋白 无 有 脂多糖 无 有 革兰氏染色法原理  G+ 菌：肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞仍呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，酒精将细胞脱色，细胞无色，番红复染后呈红色。 革氏阳性菌 革氏阴性菌 肽聚糖 含量高，交联密 含量低，交联疏松 脂类 一般无 含量高 乙醇作用 脱水作用 脂溶作用 孔径缩小，结构更紧密 孔径增大，结构变得疏松 大分子复合物滞留 大分子复合物溶出 结果 紫色 红色 细胞壁结构与革兰氏染色的关系 革氏阳性菌与革氏阴性菌之间染色的区别在于细胞壁的物理性质。细胞壁中的肽聚糖本身并不被染上颜色，但它可作为渗透性屏障阻止结晶紫与碘大分子复合物的流失。 革兰氏阳性和阴性细菌的细胞壁比较 革兰氏阳性和阴性细菌的一些生物学特性的比较 抗酸细菌的细胞壁： 分枝杆菌的细胞壁主要分枝菌酸（Mycolic acid）。抗酸细菌被酸性复红初染后，难以被盐酸乙醇脱色，因而再经美兰复染后仍为红色，而一般的细菌脱色成功染成蓝色。 抗酸细菌虽然革兰氏染色结果为阳性，但其细胞壁结构类似阴性菌：肽聚糖含量少，类脂（分枝菌酸和索状因子）含量高（60%），分枝菌酸整齐地在细胞表面排成两层，亲水头在外侧，疏水尾在内测，形成高度有序的膜，外界物质难以透入细胞内部。 4. 缺壁细菌 缺壁细菌 实验室形成 自然界长期进化形成 自发缺壁突变 人工方法去壁 彻底除尽 部分去除 L型细菌 原生质体 球状体 枝原体 细菌细胞壁缺陷型或L型(bacterial L form)：细胞壁受损后仍能生长和分裂的细菌。在一般环境中不能耐受菌体内的高渗透压而将会涨破死亡。在高渗环境下，仍可存活。 革兰阳性菌细胞壁缺失后，原生质仅被一层细胞膜包住——原生质体(protoplast)。 还残留了部分细胞壁，革兰阴性菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护——球状体(spheroplast)。 4. 缺壁细菌 细菌L型呈高度多形性，大小不一。着色不匀，无论其原为革兰阳性或阴性菌，形成L型大多染成革兰阴性。 (1) 形态和染色性 临床分离葡萄球菌L型 葡萄球菌L型回复后 细菌L型生长缓慢，营养要求高，必须用高渗的培养基。 细菌L型在高渗的培养基上生长后形成三种类型的菌落。 （2）培养特性和菌落形态 丝状菌落 颗粒型菌落 油煎蛋样菌落 （典型L型菌落） 5. 枝原体(Mycoplasma) 在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。因它的细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇，?所以即使缺乏细胞壁，其细胞膜仍有较高的机械强度。 （二）细胞膜 (cell membrane) 细胞膜液态镶嵌模型 细菌细胞膜的结构与真核细胞者基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。 细菌细胞膜的功能与真核细胞者类似，主要有物质转运、生物合成和呼吸等作用。 间体：是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于革兰阳