苹果酸脱氢酶（MDH）的测定方法及在肝炎中诊断价值的研究.docVIP

精品论文 参考文献 苹果酸脱氢酶（MDH）的测定方法及在肝炎中诊断价值的研究 北华大学附属医院 吉林吉林市 132011 摘要：目的 苹果酸脱氢酶（MDH）的测定方法——速率法。进一步探讨、研究MDH在肝炎诊断中的意义和价值。方法 建立了苹果酸脱氢酶的检测方法——速率法，并制备成试剂盒。同时对120例健康体检者、120例肝炎病人和65例肝癌、65例肝硬化病人同时进行了MDH的检测分析。结果 肝炎病人血清中苹果酸脱氢酶明显升高，是对照组的5.2倍。急性肝坏死时升高的更突出，是对照组的11.2倍，经统计学处理Plt;0.01。肝炎的初期和病情的极期升高的幅度与严重性相关。结论 用速率法判定MDH快速、简便、准确、试剂样品的用量小，可用于各型自动生化分析仪。MDH是肝炎的诊断、判断病情、估计愈后、观察疗效的良好指标，可提高肝炎的早期诊断率。 关键词：苹果酸脱氢酶；速率法；肝炎；肝硬化 苹果酸脱氢酶发现于1910年，肝脏含量丰富，到目前为止分为线粒体中的M-MDH和位于胞浆中的C-MDH两种[1]，国外有人报道临床意义和测定方法，国内报道很少，临床应用主要用于肝炎的检测。测定方法为分光光度法和比色法。速率法未见有报道及试剂盒提供。我们于2005年起对MDH的检测方法和对肝炎的诊断价值进行研究。旨在于为肝炎的诊断提供新的敏感可靠的指标。弥补肝功能常规组项的缺陷。 1 材料与方法 1.1 试剂盒测定的原理 在 340nm波长下，测定每分钟MDH吸光度的变化值（AA/分钟），计算MDH的活性。 1.2 试剂盒测定的方法及主要参数 1.2.1 测定方法：速率法 1.2.2 主要参数：反应温度37℃，测定时间60s，延迟时间：60s。 试剂用量250mu;L，样品用量25mu;L，反应波长340nm，反应方向：正反应。 1.3 研究对象 1.3.1 正常对照组 从健康体检中取健康人120例，年龄在28~74岁，平均年龄46.8岁，其中男58人，女62人。 1.3.2 试验组：120例，根据肝炎分型九项、肝功能检查、超声、临床症状体症诊断为肝炎的住院病人，不伴有它疾病，年龄30~75岁，平均年龄47.78岁，其中男59人，女61人。肝坏死病人15例。 1.3.3 试验对照组 肝癌65例，年龄25~76岁，平均年龄47岁，男35人，女30人。肝硬化病人65例，年龄29~64，平均年龄44.4岁，男39人，女36人。 1.4 实验方法和步骤 1.4.1 标本的采集 采集时间为每天早6：00~9：00时，取静脉血2.5ml。 1.4.2 仪器与试剂： （1）已制备成的试剂盒（MDH诊断试剂盒） （2）全自动生化分析Areset2000。 1.4.3 标本的检测：按仪器操作规程进行MDH检测。 1.5 统计学处理方法 实验结果以macr;X plusmn;SD表示，试验组和对照组比较采用t检验。 2 结果 见表1-3 肝炎病人血清中的MDH明显升高，是对照组的5.2倍，经统计学处理Plt;0.01 3 讨论： 3.1 肝炎病人MDH检测的临床意义。 我们的研究结果表明，肝炎病人MDH明显升高，与对照组比较有显著性差异，经统计学处理Plt;0.01。在肝炎发病的初期和极期，病人血清中MDH升高的幅度与病情的严重性相关[2]。当急性肝炎发生坏死时，MDH升高的更为突出。本研究15例肝坏死的病人，MDH是对照组的5.2倍。急性肝炎患者血清中MDH下降的其为缓慢[3]。甚至在黄痰出现后5-8周，AST、M-AST、LDH、GLDH恢复正常后，血清中MDH仍处于高水平。??可能于肝炎时线粒体型MD释放出量大（占线料体酶量的90%），再加上MD-MD在血流中的半寿期较长（28天）有关。[4]肝癌、肝硬化病人血清中MDH轻度升高与对照组比较Plt;0.05。该酶的测定对判断病情、估计预后、指导治疗具有十分重要的意义。 3.2 苹果酸脱氢酶检测试剂盒的应用前景。我们建立苹果酸脱氢酶的检测方法速率法，并制备成了试剂盒，确立了参考区间：12~30U/L。同时对120例肝炎病人，65例肝癌病人和65例肝硬化病人，120例健康体者进行了检测分