肝炎病毒概述.ppt

鉴别抗-HBC假阳性 ①如出现HBsAg阳性，提示低水平携带，而抗HBs出现阳性，提示既往感染； ②检测HBV DNA，阳性提示低水平携带； ③观察疫苗接种反应，出现回忆反应者为既往感染，原发反应者为假阳性，无反应者为低平携携带。 急性和慢性HB标志物存在模式 标志物 急性HB 慢性HB HBsAg 先阳性、后消失 阳性、持续 抗HBclgM 阳性、高效价 低效价或者阴性 抗HBc总抗体 阳性 阳性 HBeAs／抗HBe 先HBeAg阳性，随后抗HBe阳转 HBeAg或者抗HBe阳性 HBV DNA 先阳性、后消失 持续存在、效价高或低 抗HBs 恢复期出现 通常阴性 3．检测HBV核酸 HBV DNA是诊断HBV感染最直接的证据， 可用杂交 PCR法检测定性或者定量检 测。采用PCR技术，可在HBsAg出现前2 —4周检出HBV DNA。 PCR法检测HBV DNA不仅可作为HBsAs阴 性HBV感染的诊断，对于HBV感染者的 传染性判断、研究HDV基因变异以及抗 病毒疗效的评价等。 * 微生物检 1．电镜检测标本病毒颗粒 在临床上不 实用，最初采用免疫电镜发现HAV。 将发病早期粪便上清液，与特异性抗 体作用，观察形成的免疫聚集物。 敏感性大约为106个病毒／ml。 2．检测标本抗原 HAV只有一个抗原型， 采用ELISA检测，先用抗HAV抗体包被 ELISA板微孔，然后加入待测标本,HAV 抗原与固相表面抗HAV抗体结合。再加 入酶标记的抗HAV抗体，底物显色后测 定吸光度判断是否存在HAV抗原。能检 测到lng的HAV蛋白。 常用IgM抗体捕捉ELISA检测，其敏感性和特 异性高。原理是用抗人IgM重链包被微孔使 之固相化。能捕捉IgM抗体，抗HAV-IgM与加 入的HAV抗原及其IgG抗体和辣相氧化物酶的 结合物(抗HAVIgG-HRP)顺序结合，在反应孔 表面形成抗人μ链·抗HAVIgM-HAVAg-抗 HAVIgG-HRP的免疫复合物，并使底物／显色 剂系统显色。 2)检测抗HAV lgG或者抗HAV总抗体：采集患者双份血清，采用ELISA方法检测抗HAVIgG或者总抗体。如果特异性抗体的效价有明显升高，表明期HAV感染。由于大多数患者在就诊时已经产生高效价的抗HAV抗体，因此应用上有限。双份血清检出抗HAV抗体，仅能提示是既往感染。 五、微生物检验 1．标本的采集 HBV血清学标志物相 当稳定,血液标本无需特殊处理。 用于分析 HBV核酸的标本，应于采集后6h内 处理标本，并在24h内检测，其抗 凝剂应为枸橼酸盐或 EDTA。 2．检测HBV血清学标志物 (1)HBsAg和抗HBs HBsAg阳性表示存在HBV感染。在血清中的存在时间不超过6个月。如果HBsAg持续存在6个月以上，一般认为处于携带状态，机体清除病毒的可能性很低。在HBsAg从血清消失后发生抗HBs血清阳转。抗HBs是一种中和抗体，表明病毒基本清除，是痊愈的重要标志。也是疫苗免疫成功的标志。 (2)HBeAg和抗·HBe HBeAg是HBV复制的指标，持续存在时间不超过10周，如超过10周则提示感染转为慢性化。抗-HBe出现于HBeAg阴转后，其出现比抗HBs晚但消失较早。HBeAg阴转表示病毒复制水平降低，传染性下降，病变趋于静止。 pre-C区基因变异可产生HBeAg阴性的 HBV 感染，抗-HBe可呈阳性，病毒仍复制活跃， 病变可持续进展。 临床上有下列表现时要考虑 pre-C区基因发 生变异：①HBeAg(—)，抗-HBe(—)或(+)； ②HBV DNA(+)；③活动性肝病；④肝组织中 HBcAg呈浆型大量表达。 (3)HBcAg和抗HBc： HBcAg是HBV的核心部分，是HBV存在和复 制活跃的直接指标。临床通常不检测 HBcAg，而是检测抗-HBc。 抗-HBc出现较早，常紧继HBsAg和HBeAg之 后就可在血清中检出，早期以IgM为主， 一般持续6—18周。作为急性HBV感染指标， 但慢性患者也可持续低效价阳性，尤其是 活动时。恢复期和慢性感染以IgG型抗- HBc为主，可持续存在数年。 单项抗- HBc阳性 ①既往感染，抗HBs滴度低测不出。 ②低水平病毒携带，HBsAg因效价低而 检测不出。 ③核心窗口期，血清中HBsAg和HBeAg 消失，抗HBs尚未出现，此时抗HBc lgM可能呈阳性。 ④被动获得抗HBC，如经输血和胎盘获得。 ⑤抗HBC假阳性。 *