中药材及其制剂分析.ppt

Structure Hypaconitine（次乌头碱） Benzoylhypaconine(苯甲酰次乌头碱 ) 从制川乌中分离得到苯甲酰次乌头碱、 苯甲酰新乌头碱2个单酯型生物碱,为制川乌炮制原理的阐明，质量评价和质量控制奠定了基础。 乌头类药材的HPLC定量分析 在制川乌质量控制方面,国内外学者在生物碱含量测定方法上作了大量研究，高效液相色谱法测定生物碱成分，选择性较好，但目前报道的方法中多采用二乙胺或三乙胺为流动相，碱性较强，易破坏色谱柱固定相，且一般只测定双酯型乌头生物碱，而单酯型乌头生物碱测定及同时测定单、双酯型乌头生物碱的文献几乎没有报道。  乌头类药材的HPLC定量分析 HPLC色谱条件 仪器: 岛津10AD,岛津2010/SPD-M, Waters 2690 色谱柱: DiamonsilTM C18 5μm, 4.6 mmX250 mm 流动相: 流动相A: 乙腈-四氢呋喃 流动相B: 0.1M 醋酸铵 梯度洗脱 流速：0.8 mL?min-1 检测波长：235nm 柱温：室温 　测定数据的精度要求，一般应满足以下规定：回收率计算值在95－105％范围， 相对标准偏差（RSD%）薄层扫描法＜5%，高效液相色谱法/气相色谱法＜3%。 精密度试验 仪器精密度 薄层扫描法 同板精密度 异板精密度 重复性试验 指在同样的操作条件下，在较短的时间间隔的精密度。一般取不少于5份样品，重复测定，以含量值计算RSD%。 重现性试验 指不同试验室之间的精密度(用于合作研究或协作标定等)。 中药质量标准中含量测定项要求 重复性： 　以下几种方法可选择使用。测定数据的精度要求，一般应满足以下规定：相对标准偏差（RSD%）薄层扫描法＜5%，高效液相色谱法/气相色谱法＜3% 测定同一浓度6份样品，计算含量平均值和　　RSD% 测定3个不同浓度9份样品（三个不同浓度，每个不同浓度分别制备3份供试品溶液），高低浓度可以结合线性范围测定项目考察设计。一般中间浓度为正常测定的样品浓度。计算9份样品的含量平均值和RSD% 线性关系考察 以分析方法的响应值对被分析物的浓度或含量作图，或用适当的统计方法评价两者是否呈线性关系，以及线性的程度。 * 至少要用5个浓度 * 线性关系的测试范围一般为正常分析量的25%-150% 中药质量标准中含量测定项要求 将苦参碱对照品稀释至20%、50%、100%、120%、150%五个浓度，按上述色谱条件，分别精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以对照品进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线 计算得回归方程： 苦参碱：y=2056508.06x+36389.72 r=0.9997。 表明苦参碱在0.792-5.996μg 范围内具有良好的线性关系。 专属性试验 指可能存在的组分，如类似物、降解物、基质等存在时，对被分析物准确可靠测定的能力。 空白阴性对照 与参照物比较 保留时间 DAD吸收光谱等 对照物加入试验 中药质量标准中含量测定项要求 耐用性试验 * 指试验参数发生一定范围的改变时，测量保持不受影响的能力。 不同色谱柱比较 流动相组成比例变化比较(不同pH值) 不同柱温比较 不同检测波长的比较 中药质量标准中含量测定项要求 按中药材所含化合物的类别，选择适当溶剂进行提取。根据提取物的性质，选择适当的分离方法，如：正相或反相HPLC、CE等等，摸索出若干套最佳色谱条件，尽可能达到样品中的各化学成分被分离和检测到。 结合各分离组分的性质，选择合适的检测系统和手段，如：紫外、蒸发光散射、HPLC/MS、GC/MS等方法获取化学成分的数据。 中药材质量评价中的指纹图谱方法 指纹图谱是指采用一定的分析方法得到的中药化学物质或生物物质的图谱，包括化学指纹图谱和生物指纹图谱。 用于中药质量控制的主要为化学指纹图谱，即采用一定的分析方法得到的能够标示该中药主要化学成分的图谱，简称指纹图谱。 中药材质量评价中的指纹图谱方法 我国对黄芪、三七、黄芩等多种常用中药材的指纹图谱进行了系统研究，建立了指纹图谱检测标准，此方法对比较药材质量与鉴别物种具有较大的作用。