薄层扫描法测定肝毒清胶囊中小檗碱含量的方法学研究.docVIP

精品论文 参考文献 薄层扫描法测定肝毒清胶囊中小檗碱含量的方法学研究 张剑1 张珩2 焦韵苹3（ 1 陕西医药控股集团有限责任公司 7 1 0 0 7 5 )( 2 陕西省妇幼保健院 陕西西安 7 1 0 0 0 3 )( 3 陕西省第二人民医院 陕西西安 7 1 0 0 0 1 ） 【摘要】目的 建立肝毒清胶囊中小檗碱的含量测定方法。方法 采用硅胶G 薄层板，展开剂为正丁醇—乙酸—水（7:1:5）取上层，在366 n m 下进行薄层扫描测定小檗碱含量，并进行测定方法学的研究。结果 小檗碱的含量测定线性范围为0.048 ～ 0.240 mu;g，回归方程为Y=635.7X+184.8（r=0.999 1，n=5），平均加样回收率为 99.96%（RSD=2.6%，n=6），其他成分对样品测定无干扰。结论 本方法简便易行、准确可靠、重复性好，可作为肝毒清胶囊中小檗碱含量测定的方法。 【关键词】薄层扫描 小檗碱 含量测定 引言 肝毒清胶囊为中药复方，益气健脾，疏肝解毒，主治各种病毒性肝炎，尤其慢性病毒性肝炎引起的肝损伤。其按君、臣、佐、使配伍，处方中君药为黄柏，臣药为栀子、大黄，佐使之药为板蓝根、黄芩、柴胡、人参、白术。本研究首选其君药黄柏的有效成分小檗碱作为含量测定指标，采用薄层扫描法[1] 为中药复方肝毒清胶囊建立有效成分含量测定的标准，并进行含量测定方法的方法学考察。 1 仪器与试药 1.1 仪器 T L C S C A N N E R Ⅲ型薄层色谱扫描仪（瑞士CAMAG，配C A T S4.05 软件）；KQ -500D E 数控超声仪（昆山市超声仪器）；BSA124S 电子天平（德国赛多利斯）；RE-52 型 旋转蒸发仪（上海青浦）。 1.2 试药 肝毒清胶囊（自制）；盐酸小檗碱标准品（中国药品生物制品检定所）；黄柏对照药材（中国药品生物制品检定所）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；其他生药材均购于西安怡康医药超市，其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 对照品及供试品溶液制备 2.1.1 供试品溶液 精密称取肝毒清胶囊粉末0.7000g， 加70% 乙醇30.0m L，32kHz、60℃条件下超声提取30min，4000r?min-1 离心5min，取上清液减压浓缩至合适体积，甲醇定容至5mL，即得。 2.1.2 对照品溶液 小檗碱对照品溶液精密称取盐酸小檗碱标准品1.2mg，甲醇溶解并定容至25mL 容量瓶中，即得0.048mg?mL-1 的对照品溶液。 肝毒清胶囊阴性对照液按处方比例称取除黄柏外的其他药材，模拟肝毒清胶囊制备工艺制备缺黄柏的阴性样品，再按2.1.1 方法制备阴性对照液。 黄柏对照药材溶液取黄柏对照药材，按2.1.1 方法制备黄柏对照药材溶液。 2.2 薄层扫描条件及测定 2.2.1 薄层分离条件[2] 薄层板为硅胶G 板，厚500mu;m，0.5% 羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂；展开剂为正丁醇—乙酸—水（7:1:5）取上层。 2.2.2 薄层扫描条件 采用单波长线性扫描，光源为氘灯，检测波长lambda; ＝ 366n m，线性仪CH=2、SH=3，扫描速度20 mm?min-1，狭缝宽度1.0times;5.0 mm。 2.2.3 标准曲线的制备 分别精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0 和5.0mu; L（ 含小檗碱0.048、0.096、0.144、0.192 和0.240mu; g） 点于同一薄层板上，展开，按2.2.2 项下进行扫描，纪录扫描图谱, 测定峰面积, 以峰面积对对照品进样量（mu;g）进行线性回归, 计算回归方程为：Y ＝635.7X+184.8，r ＝ 0.9991。结果表明：在0.048 ～ 0.240mu;g 范围内，小檗碱峰面积值与进样量线性关系良好。 2.2.4 供试品含量测定[3] 用微量进样器分别取小檗碱对照品溶液4mu;L、供试品溶液2mu;L 交叉点于同一薄层板上，按2.2.2 项下扫描测定，并按下式计算供试品中小檗碱含量： 其中：A 对，对照品峰面积积分值；A 供，供试品峰面积积分值；m 对，对照品点样量。 2.3 干扰性试验 分别吸取黄柏对照药材溶液、小檗碱对照品溶液、肝毒清胶囊供试品溶液及缺黄柏的阴性对照溶液，点于同一