吸光光度法的灵敏度与准确度PPT.pptVIP

8.3 吸光光度法的灵敏度与准确度;例1 邻二氮菲光度法测铁  ?(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38  计算? 和; c =1.0mg/L=1.0×10-3 g /1000mL = 1.0×10-4g/100mL;二. 准确度—仪器测量误差;10;显色反应的选择;8.4.2 显色条件的确定;2. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定）;邻二氮菲－亚铁反应完全度与pH的关系 ;pH3～8为适宜 的酸度范围;3. 显色温度及显色时间;8.4.3 干扰及消除;Co2+, Zn2+, Ni2+, Fe2+ ;2. 物理法 ; 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. ;8.5 吸光光度法的应用;3) 蛋白质测定—溴甲酚绿、考马司亮蓝等 4) 氨基酸测定—茚三酮(紫色化合物) 5) 水质检测: NH4+、NO2-、Mn2+、Fe2+、SO42-、Hg2+---- 6) 药物含量测定—比吸光系数定量；荷移光谱法测定. 7) 紫外吸收(UV): NO2-、NO3-、SO42-、SO32-、CO32-、SCN-、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋白质等。;2. 多组分的测定; 3. 光度滴定;典型的光度滴定曲线;4. 络合物组成的测定;(2)等摩尔连续变化法:;表观形成常数的测定 (设M、R均无吸收);5.一元弱酸离解常数的测定 p330;MO吸收曲线;MO离解常数的测定作图法;6. 双波长分光光度法消除干扰(不要求);双波长分光光度法消除浑浊背景干扰;7. 导数分光光度法(不要求);常药降压片中氢氯噻嗪含量的测定;肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取;8.1 了解分子对光的吸收与溶液颜色的关系. 吸收曲线—定性分析的基础。 定量分析的基础—朗伯-比尔定律：A=?bc=-lgT 式中各参数的物理意义，定量计算。 8.2 了解目视比色法、分光光度法的特点，分光光度计的基本部件。 8.3 灵敏度的表示—摩尔吸光系数的意义和计算； 准确度—适宜的测量范围、偏离比尔定律的原因。 8.4 显色反应及条件的确定: 显色剂用量、酸度、时间、温度、干扰及消除。 8.5 应用: 单一组分测定示例、多组分测定、光度滴定、络合物组成的测定、酸碱离解常数的测定。;第一章 绪论—科学试验及其误差控制 第一节 科学研究与科学试验 第二节 试验方案 第三节 试验误差及其控制 第四节 试验统计学的发展和本课程 的主要内容;第一节 科学研究与科学试验;二、科学研究的基本过程和方法;(二) 科学研究的基本方法 ;第二节 试验方案;一、试验因素与水平;试验方案按其供试因子数的多少可以区分为以下3类：;二、试验指标与效应;三、制订试验方案的要点; 4. 试验方案中应注意比较间的唯一差异原则，以便正确地解析出试验因素的效应。 5. 拟订试验方案时必须正确处理试验因素及试验条件间的关系。 6. 多因素试验提供了比单因素试验更多的效应估计，具有单因素试验无可比拟的优越性。 ;第三节 试验误差及其控制;一、试验数据的误差和精确性; 观察值间存在的变异可归结为两种情况: 一种是完全偶然性的，找不出确切原因的，称为偶然性误差(spontaneous error)或随机误差(random error)； 另一种是有一定原因的称为偏差(bias)或系统误差(systematic error)。 系统误差影响了数据的准确性，准确性是指观测值与其理论真值间的符合程度； 而偶然误差影响了数据的精确性，精确性是指观测值间的符合程度。 ; ;三、随机误差的规律性;四、随机误差的层次性;五、试验误差的控制;第四节 试验统计学的发展和本课程的主要内容;17世纪Pascal 和Fermat的概率论； 18世纪De Moivre、Lapl