春高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件高中教育精.pptVIP

春高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件高中教育精.ppt

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一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 解析:碳源是提供碳元素的物质,氮源是提供氮元素的物质,所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原因是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 答案:(1)葡萄糖 尿素 (2)葡萄糖 尿素 (3)具有。以尿素为唯一氮源的培养基可以分离得到产生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述,其中错误的是(  ) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 h D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 解析:为保证结果准确可靠,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 答案:D 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 统计菌落数目的方法 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 二、“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验过程 土壤取样:从肥沃、湿润的土壤中,用无菌小铁铲铲去表层土,迅速取土壤并装入无菌信封密封 制备培养基:准备选择培养基,以尿素为唯一氮源制备9个平板培养基 样品的稀释:在火焰旁称取土壤10 g,放入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,振荡使土样与水充分混合,将菌分散。制成101倍土壤稀释液,用一支1 mL无菌吸管从中吸取1 mL土壤悬液注入盛有9 mL无菌水试管中,吹吸三次,使充分混匀,制成102倍土壤稀释液,以此类推制成103、104、105、106倍土壤稀释液 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 取样涂布:在上述培养基的9个平板底面,每三个一组分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释度,然后用三支1 mL无菌吸管分别从104、105、106倍的三管土壤稀释液中吸取0.1 mL对号放入已写好稀释度的平板中,用无菌涂布器在培养基表面轻轻地涂布均匀(如图) 样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 培养观察:将培养基平板倒置于30~37 ℃温室中培养1~2 d,每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果 菌落计数:常用稀释涂布平板法,设计如下表格记录并计数 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 目标导航 预习导引 目标导航 预习导引 一 二 三 一、细菌分离与计数的研究思路 1.自然界中目的菌株的筛选 (1)依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。 (2)实例:PCR技术中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中分离到的。? 2.实验室中目的菌株的筛选 (1)理论依据 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 (2)选择培养基 在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 目标导航 预习导引 一 二 三 3.统计菌落数目 (1)常用方法:活菌计数法。 ①统计依据 a.当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。 b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 ②注意事项:为保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 ③计算方法 每克样品中的菌株数=(C÷V)×M ,其中C代表某一稀释度下平板上的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。 (2)其他方法:利用显微镜直接计数。 目标导航 预习导引 一 二 三 4.设置对照 目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 目标导航 预习导引 一 二 三 二、实验设计 1.实验设计的内容 实验设计包括对实验方案,所需仪器、材料、用具和药品,具体的实验步骤以及时间安排等

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