春高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定课件高中教育精.pptVIP

一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 二、DNA的粗提取与鉴定的实验操作 1.方法步骤(以鸡血细胞为例) 溶解核内DNA:上述滤液加入物质的量浓度为2 mol/L 的NaCl溶液,玻璃棒沿同一个方向搅拌 过滤除去不溶杂质 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 析出含DNA的丝状物:向上述滤液缓缓加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液浓度相当于物质的量浓度为0.14 mol/L) 过滤含DNA的丝状物:用多层纱布过滤,含DNA的丝状物留在纱布上 DNA的丝状物再溶解:再次用物质的量浓度为2 mol/L 的NaCl溶液溶解DNA的丝状物 提取含杂质较少的DNA:向上述滤液中加入等体积的体积分数为95%的冷却酒精溶液,静置2~3 min,溶液中出现白色丝状物,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 2.DNA的鉴定 实验原理 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 【例2】 下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是(　　) A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 解析：洗涤剂能瓦解细胞膜,使DNA从细胞中释放出来,但是不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。将DNA丝状物溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,然后放入二苯胺试剂,沸水浴后冷却可观察到蓝色出现。“DNA析出”的步骤中,必须用玻璃棒缓缓搅拌使DNA聚集,防止DNA在搅拌的过程中断裂而使DNA获得量减少。 答案：C 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 大吉大利 打击到吗试试 目标导航 预习导引 目标导航 预习导引 一 二 一、提取DNA的方法 1.基本思路:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 2.DNA的理化性质 目标导航 预习导引 一 二 3.DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色。 DNA在不同浓度的NaCl溶液中析出与溶解过程是否属于变性?为什么? 提示：不属于。析出与溶解只是DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度发生改变,使得处于溶解状态的DNA分子出现量的差异过程的体现,该过程对DNA分子的结构没有任何影响,不属于变性。 目标导航 预习导引 一 二 二、DNA粗提取与鉴定实验设计 1.过程 (2)破碎细胞,获取含DNA的滤液 ①动物细胞的破碎(以鸡血为例):在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液。 ②植物细胞的破碎:(以洋葱为例)先将洋葱切碎,加入一定量的洗涤剂和食盐,充分搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。 目标导航 预习导引 一 二 (3)去除滤液中的杂质 方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。 方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,其中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三:将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min。? (4)DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于酒精溶液这一原理,可从溶液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状物。 (5)DNA的鉴定 将呈白色丝状物的DNA溶解于5 mL物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,再加入4 mL的二苯胺试剂,沸水中加热5 min,冷却后观察溶液颜色,注意要同时设置对照实验。? 目标导航 预习导引 一 二 2.操作提示 (1)防止血液凝固:每100 mL血液需加入3 g柠檬酸钠。 (2)减少产生泡沫:加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和。 (3)避免DNA断裂:加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓。 (4)二苯胺试剂要现配现用。 目标导航 预习导引 一 二 (1)你能总结一下DNA、RNA在细胞中的分布规律吗? 提示：对真核生物而言,DNA主要存在于细胞核(染色质)中,线粒体、叶绿体中也有少量的DNA。RNA主要存在于细胞质(细胞质基质、核糖体、叶绿体、线粒体)中。 (2)你能列举不能