高效液相色谱法同时测定茶碱和多索茶碱的血清药物浓度的效果分析.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法同时测定茶碱和多索茶碱的血清药物浓度的效果分析 长沙市第一医院 湖南长沙 410005 【摘 要】目的：建立血清中茶碱和及索茶碱血清浓度同时测定高效液相色谱法并应用于临床治疗。方法：选取的样本经过甲醇沉淀蛋白处理后进行分析，色谱（条件）为：Eclipse XDB-C 18（4.5 mmtimes;230mm，5mu;m）色谱柱，流动相为甲醇—水（55：45），流速为1.0ml?min－1，检测波长为：253 nm，柱温为30 ℃。结果：茶碱保留时间为：2.870min低于多索茶碱保留时间3.279min；茶碱（3.9—60.0）mg/L以及多索茶碱（2.6—50.0）mg/L的浓度线性关系较好；茶碱（3.9—60.0）mg/L以及多索茶碱（2.6—50.0）mg/L的浓度线性关系较好；茶碱回收率最高为50.0mg/L，其次为15.0mg/L、5.0mg/L、；多索茶碱回收率最高为13.0mg/L、，其次为40mg/L、5.0mg/L；本方法回收率较高，三种浓度（低、中、高）全部＞95%（95.30%—100.20%），而三种浓度日内变异全部＜5%（0.99%—2.13%）。结论：高效液相色谱法同时测定茶碱和多索茶碱血清药物浓度，检测结果稳定可靠，适用于临床药物动力学研究及血药浓度监测，该种方法值得借鉴和推广。 【关键词】高效液相色谱法；茶碱；多索茶碱 黄嘌呤类衍生物有氨茶碱、多索茶碱等，在临床上主要治疗支气管哮喘以及喘息性支气管炎，而氨茶碱是茶碱和乙二胺的复合物，茶碱的水溶性是通过乙二胺来增强其作用，茶碱是由氨茶碱体内所释放，其药理的主要作用机制是茶碱[1]。茶碱类的药物因个体有较大的差异，所以血药的浓度安全范围窄，因此在应用治疗的过程中发生中毒的可能性较高，目前临床上大多数存在茶碱类药物和多索茶碱类药物配合使用，为此同时测定以上类型的药物的血药的浓度应用价值较强，为研究建立对茶碱级多索茶碱的同时测定的高效液相色谱法，特将相关的材料报道如下： 1材料与方法 1.1一般材料 1.1.1仪器：（1）戴安高效液相色谱仪（P680）；（2）电子天平（由日本岛津提供）型号：AUW120D；（3）旋涡混合器（WH－866）；（4）高速离心机，型号：TGL—16A（B）；（5）液体快速混合器（由江西医疗器械厂提供，型号：YKH—Ⅱ）；（6）高速冷冻离心机（由科大创新股份有限公司中佳分公司提供，型号：HC—3618R）；（7）干式氮吹仪（由天津恒奥科技发展有限公司提供，型号：HGC—12A）；（8）可调移器等。 1.1.2试验药物：（1）茶碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号：0121—9202）；（2）多索茶碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100625—201202）；（3）甲醇、甲酸为色谱纯；（4）纯化水，其余试剂是分析纯。 1.2色谱条件 （1）色谱柱：Eclipse XDB-C18（4.5 mmtimes;230mm，5mu;m）；（2）流动相：甲醇—水，比例（55：45）；（3）流速：1.0ml?min－1；（4）检测波长：240 nm；（5）柱温：30 ℃；（6）进样量：20mu;L。 1.3溶液制备 对照品：取适量的茶碱级多索茶碱对照品，使用甲醇将其溶解后定容量为：10ml，并配成500mg/L和600mg/L的储备液后，放入—30℃冰箱将其保存；（2）标准血样：使用精密仪器去以上两种药物的适量储备液，使用甲醇将其稀释为标准溶液，在溶液内加入空白的血清，将其茶碱含量配制为：3.5mg/L、7.0mg/L、10.0mg/L、15.0mg/L、30.0mg/L、60.0mg/L，多索茶碱的浓度配制为：2.5mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、12.5mg/L、25.0mg/L、50.0mg/L，以上配制后的溶液备用；（3）血清质控：去以上两种药物对照品备液适量，同样使用甲醇将其配制为茶碱浓度：5.0mg/L（低质控）L、15.0mg/L（中质控）、50.0mg/L（高质控）；多索茶碱浓度为：5.0mg/L（低质控）、13.0mg/L（中质控）、40mg/L（高质控），以上配制后的血清溶液，放入—30℃冰箱将其保存。 1.4所有样品的处理方法 血清的样本取200mu;L，并加入甲醇（600mu;L），进行涡旋混匀，离心半径：15000r/min，时间：5min，取上清液20mu;L进样。 1.5专属性试验 去空白的血清，按照1、