鼻咽癌中自发凋亡及相关基因表达与放射敏感性的研究.docVIP

精品论文 参考文献 鼻咽癌中自发凋亡及相关基因表达与放射敏感性的研究 钟晓鸣1 骆萍2 谢洪辉1 （1江西省肿瘤医院放疗科 330029；2南昌市三医院乳腺肿瘤科 330003） 【中图分类号】R739.6【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）03-0038-03 【摘要】 目的 探讨鼻咽癌组织中细胞自发凋亡及凋亡基因P53、bcl-2的表达在预测放射敏感性中的意义。方法 对60例初治、无远处转移、放疗前鼻咽癌患者活检标本分别采用TUNEL法检测细胞自发凋亡，免疫组化技术检测P53和bcl-2基因的表达情况；临床观测患者放疗过程中鼻咽部肿瘤的消退情况。结果 在鼻咽癌组织中突变型P53和bcI—2基因的表达水平呈正相关（r=0.642，Plt;0.05）；鼻咽癌组织中突变型P53基因表达水平与细胞自发凋亡率呈负相关（r=-0.865，Plt;0.05）；鼻咽癌组织中bcl-2基因表达水平与细胞自发凋亡率呈负相关（r=-0.675，Plt;0.05）。突变型P53基因阳性表达水平与鼻咽癌瘤体的消退率呈负相关；bcl-2基因阳性表达水平与鼻咽癌瘤体的消退率呈负相关（放疗40Gy时，Rs=-0.751；放疗70Gy时，Rs=-0.820；Plt;0.05）；自发凋亡率与鼻咽癌瘤体的消退率呈显著正相关（放疗剂量为40Gy时，r=0.869；放疗剂量为70Gy时，r=0.918；Plt;0.01）。患者的性别、年龄及分期与鼻咽癌瘤体的消退率均无相关性(Pgt;0.05)。结论 本研究表明鼻咽癌中细胞自发凋亡率及凋亡相关基因P53、bcl-2的表达与即时疗效密切相关, P53、bcl-2基因之间可能存在协同作用；细胞自发凋亡率和P53、bcl-2蛋白可以作为鼻咽癌放射敏感性可能的预测指标, 联合检测自发凋亡率和P53、bcl-2蛋白意义更大。 【关键词】鼻咽癌 细胞凋亡 P53 bcl-2 放射敏感性 鼻咽癌是我国最常见的头颈部恶性肿瘤，放射治疗是目前最主要的治疗手段，而肿瘤放射敏感性是影响肿瘤放射治疗成败的重要因素之一。如何预测及提高肿瘤细胞的放射敏感性，一直是放射肿瘤学家和放射生物学家关注的问题。在放射肿瘤学领域，凋亡被认为是一种重要的放射敏感性指标，而且许多基因参与凋亡的调控，其中P53和bcl-2尤为突出。本研究通过对60例放疗前鼻咽癌患者分别采用TUNEL法检测细胞自发凋亡率、免疫组化技术检测P53和bcl-2基因的表达，结合临床观测肿瘤消退情况，探讨鼻咽癌组织中细胞自发凋亡率及凋亡相关基因P53和bcl-2的表达与临床放射敏感性的关系,为今后临床制定个体化放射治疗方案及疗效预测提供参考。 1. 材料和方法 1.1 组织标本：60例无远处转移，放疗前的初治鼻咽癌患者。38例男性，22例女性。年龄19～68岁，病理类型均为低分化鳞癌。据08福州分期：Ⅰ期 0例，Ⅱ期 11例，Ⅲ期 49例,IV期 0例。 1.2 仪器及试剂： TUNEL法试剂盒, HC Biotin Block Kit试剂盒（P53﹑bcl-2），Primus M 6MV数字化全自动多叶光栅直线加速器,三维放射治疗计划系统。 1.3 原位末端标记法：使用DNA酶I加rTdT反应液为阳性对照，去rTdT反应液滴加PBS液替代作为阴性对照。具体步骤按试剂盒上的说明进行。 1.4 采用免疫组化两步法检测P53、bcl-2，用购买试剂公司所提供的已知P53、bcl-2阳性的切片作为阳性对照，磷酸盐缓冲液PBS代替一抗作为阴性对照。 1.5 统计方法:采用系统统计软件SPSS12.0进行方差齐性检验、单因素方差分析（Simple-way ANOVA）、多因素回归分析。 plt;0.05为有统计学意义。 2.结果 2.1 突变型P53和bcl-2基因在鼻咽癌组织中的表达：P53和 bcl-2基因表达分成—、十、十十、十十十4组。随着P53基因表达水平的增强，bcl-2基因的表达水平也呈增强趋势，在鼻咽癌组织中P53和bcl-2基因的表达水平呈正相关（r=0.642，Plt;0.05）。 2.2 鼻咽癌中自发凋亡率与突变型P53和bcl-2基因表达水平的相关性结果显示：随着P53基因表达水平的增强，细胞自发凋亡率呈下降趋势，鼻咽癌组织中突变型P53阳性表达水平与细胞自发凋亡率呈负相关（r=-0.865，Plt;0.05）；随着bcl-2基因表达水平的增强，细胞自发凋亡率亦呈下降趋势，鼻咽癌组织中bcl-2基因表达水平与细胞自发凋亡率呈负相关（r=-0.675，Plt;0.0