白藜芦醇对大鼠egr-1表达及肝细胞再生的影响word论文.docxVIP

白藜芦醇对大鼠Egr-1 表达及肝细胞再生的影响研究生：李圆导师：张劭副教授中文摘要目的：观察白藜芦醇（Resveratrol,RES）对大鼠肝大部分切除术后肝脏组织再生情况及Egr-1（Early growth response protein-1早期生长因子-1）表达的影响，探讨白藜芦醇对大鼠肝再生及保护肝功能的可能机制。方法：健康雄性SD大鼠72只，随机分为假手术组、PH(Partialhepatectomy,70%大部肝切除术)组、RES预处理组，每组24 只。手术前4天予RES组大鼠经尾静脉注射配制好的RES 溶液(质量浓度为10mg/ml)，每只予以剂量为30mg/kg.d-1。PH组注射同等对应体积的生理盐水，除假手术组外，其余两组均行70%肝大部分切除术。术后于相应时间点（1h、12h、24h、36h）获取大鼠肝组织及血液样本，并分析各组大鼠存活率、再生肝重比例、肝功能生化指标变化、病理学改变、免疫组化PCNA（ProliferatingCell NuclearAntigen增殖细胞核抗原）表达以及Western blot检测大鼠70%大部肝切除术肝组织样本Egr-1、PCNA的表达。结果：（1）、各组大鼠存活率无明显差异；（2）RES 预处理组再生肝重比例较PH组增高；RES 预处理组大鼠肝细胞浊肿、血管淤血较单纯手术组减少，双核及核分裂像肝细胞增多，肝病变减轻；RES预处理能够明显抑制大部分肝切除所致大鼠血清ALT（谷丙转氨酶）、AST（谷草转氨酶）水平的升高（P0.05）;其中降低水平最明显为术后24-36 小时之间，RES 预处理组ALT 值比PH组大鼠下降1.45-1.72 倍，而AST 值水平则下降1.33-1.91 倍。（3）WB检测显示假手术组未见明显Egr-1表达；PH组及RES预处理组术后大鼠肝组织中Egr-1水平均上调表达，RES预处理组Egr-1的表达低于PH组，术后24hEgr-1 表达下降幅度最大，相对灰度值约为PH组的1/2。（4）免疫组化及WB检测提示RES 预处理组中PCNA均有不同程度阳性表达率，且均高于PH组，两组之间的差别以24h 时相最为明显。结论:（1）、大鼠肝70%切除后，白藜芦醇可降低转氨酶，协助肝功能的恢复，减1轻肝损伤；（2）白藜芦醇可上调PCNA表达，促进肝细胞分裂增殖，减轻肝窦淤血，改善微循环；可降低Egr-1在大鼠肝部分切除术后肝脏中的表达，调节参与炎性反应，保护肝细胞，可作为临床上协助肝再生作用的潜在药物。关键词：白藜芦醇；肝再生；Egr-1；70%肝部肝切除2EffectsofResveratrolPreconditioningontheExpressionofEgr-1GeneandLiverregenerationinRatsAbstractObjective:Theaimofthisstudywastoinvestigateeffectsofresveratrol(RES)on Liverregenerationafterpartialhepatectomyinratsandexplorethepossiblemechanismthat influenceofresveratrolpreconditioningtotheexpressionofEgr-1(Earlygrowthresponse protein-1)gene.Methods:Rats weredivided into normal controlgroup, 70%partial hepatectomy group (PHgroup),andRESpreconditioninggrouprandomly.Fourdaysbeforesurgerytoratsviathe tailveininjectionreconstitutedRESsolution(massconcentrationof10mg/ml),eachtobea doseof30mg/kg.d-1.Weobtainedthespecimenofregeneratingliversandbloodinthe correspondingtime(1h/12h/24h/36h)aftermodelling.Thenweanalyzedtheresultsofratesof survivalandregeneratingliver,liverfunction.Weobservedthechangeofpathologyon regeneratingliversamplesbythehigh-powermicroscope.TheexpressionofPCNA (ProliferatingCellNuclearAntige