双重靶向条件复制型腺病毒的包装及抗肿瘤作用.pdfVIP

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第34卷第3期 西安交通大学学报(医学版) V01.34NO.3 2O1 3年5月 JournalofXi’an Sciences) Mav2013 JiaotongUniversity(Medical 双重靶向条件复制型腺病毒的包装及抗肿瘤作用 王宏芳1,刘 扬2,李金华2,吴嘉慧2,李艳博3,王志成2,刘威武2,龚守良2 (1.北京市疾病预防控制中心,北京100013;2.吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学 10。069) 重点实验室,吉林长春 130021;3.首都医科大学公共卫生与家庭医学学院,北京 telomerasereverse 摘要:目的 构建并包装以人端粒酶逆转录酶(human (CR2区缺失)蛋白表达的肿瘤细胞双重靶向条件复制型腺病毒(conditionallyreplicatingadenovirus,CRAd),并探讨 其对肿瘤细胞的抑制作用。方法 E1 hTERT启动子序 重组腺病毒(cRAd.p—hTERTA_E1Bp—E1855K,简称CRAd.p)对肿瘤细胞的抑制作用。结果 E1A 542 775 I单酶切可见1 bp和6bp两条电泳带,PCR鉴定得 列克隆正确;pShuttle—hTERTE1BpE1855K经K声n 148 148 到250、1 bp和298bp基因片段;cRAd.p经PCR扩增得到250、1bp和298bp基因片段,鉴定结果与预期完 8细胞72h后与各自对照组比较差异均有统计学意义 全相符;CRAd.p感染MCF-7、MDA-MB一231、HepG2和HTc (Po.01);CRAd.p感染MDA—MB-231细胞后10~250MOI组细胞吸光度值与对照组比较差异均有统计学意义 (Po,05或Po.01),随着感染时间延长,抑制作用越发明显。结论成功获得对肿瘤细胞具有双重靶向和溶瘤作 用的条件复制型腺病毒,为基因治疗的靶向性和有效性提供了可能。 关键词:条件复制型腺病毒;人端粒酶逆转录酶;基因治疗;抗肿瘤 中图分类号:R147 文献标志码:A 文章标号:1671—8259(2013)03一0308一05 andanti—tumoreffectof Packaging dOuble。targeted adenoVirus conditionallyreplicatiVe Yan_b03, WANG Jin~hua2,WUJia—hui2,I。I Hong—fan91,LIUYan92,LI WANG Wei—wu2,GONGShou—lian92 Zhi—chen92,I.IU Contr

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