[医药卫生]分子病理学技术在临床中应用.ppt

重点描述：随着分子遗传学的发展，对肿瘤的诊断与治疗，已经达到基因水平。 研究发现，宫颈癌的发生与TERC基因扩增有关。TERC基因是人染色体端粒酶的编码基因。端粒酶在大多数正常体细胞中无活性，随着细胞分裂次数的增加，端粒缩短，细胞死亡。在宫颈癌中，由于HPV感染，导致E6/E7蛋白的高表达，引起端粒酶活性的增加。维持端粒长度，细胞永生 化，使它们免于凋亡。 扩展： 端粒是由简单的富含T和G的DNA片段的重复序列组成。人类端粒结构为染色体末端重复上千次的TTAGGG序列所组成。DNA聚合酶不能完成线性染色体末端DNA的复制， 由于RNA引物的原因，DNA聚合酶一定会留下染色体末端的一段DNA（一段端粒）使其不被复制。那么真核细胞染色体末端的端粒就会随着细胞分裂而缩短。这个缩短的端粒传给子细胞后，随着细胞的再次分裂进一步缩短 端粒酶一种含有RNA链的逆转录酶，以自身的RNA为模板合成端粒DNA，并连接到端粒的染色体末端，延长端粒的长度。如该模板区发生基因突变将导致端粒酶的激活，使端粒长度不随细胞分裂而缩短，细胞具有了无限增殖的能力。 由于RNA引物的原因，DNA聚合酶一定会留下染色体末端的一段DNA（一段端粒）使其不被复制。随着细胞分裂次数的增加，端粒缩短，细胞死亡。 检测TERC基因的FISH产品就是子宫颈细胞hTERC位点扩增检测试剂盒。 TERC基因位于3q26,3,选择位点特异性探针，被标记为红色，同时选择3号染色体着丝粒探针作为对照，被标记为绿色。在镜下数红点就可以判断TERC基因的扩增情况。 实体瘤的检测当中FISH检测技术正在越来越多的得到应用，并且FISH检测再诊断治疗的过程中所占的位置也越来越重要。 描述重点：研究发现： 正常/炎症、CIN1样本很少显示hTERC拷贝数的增加，但是CIN2及CIN2以上者69%样本 显示hTERC拷贝数增加。各组间hTERC基因异常扩增率均有明显差异（p0.01） 统计分析：以hTERC基因扩增阳性诊断CIN2或CIN2以上病变的敏感度为82.17%,特异度为95.02%. 可以扩展： 辅助分级意义就是CIN1和CIN2的鉴别诊断.因为大家都知道，有时候病理上对CIN1和CIN2不太好区分的。而临床上对CIN1和CIN2的处理原则又是截然不同的。 有没有更准确的方法来区分CIN1和CIN2呢？检测TERC基因可以辅助病理分级，而且这个准确率在90%以上。这就为临床CIN1和CIN2的鉴别诊断提供了一个非常好的生物学指标。CIN1及以下病变：TERC阴性患者参考HPV检测情况建议采取保守的方法进行监测 CIN2及以上病变：TERC阳性患者建议采取锥切或LEEP刀等方法治疗 描述重点：2003年美国病理学杂志上的一篇文献研究也得出了相似的结论：研究者把研究对象根据TCT检测TBS分级系统分为3组，分别是正常组织样本或ASCUS或LSIL、 ASCUS或LSIL、HSIL,分别检测hTERC基因的扩增发生率。检测结果显示： TERC基因的扩增发生率随宫颈病变程度的加重而逐渐升高。正常组织样本、ASCUS和LSIL样本很少显示hTERC拷贝数的增加，但是HSIL92%样本显示TERC拷贝数增加。各组间hTERC基因异常扩增率均有明显差异（p0.01） 统计分析：以hTERC基因扩增阳性诊断HSIL以上病变的敏感性为 92%，特异性为91%。 也就是说：如果hTERC基因扩增,诊断HSIL以上的可能性为90 %以上。 如果hTERC基因不扩增,诊断HSIL以下的可能性也为90 %以上。 重点描述：卫生部就“FISH检测子宫颈上皮细胞hTERC基因扩增的临床应用研究”在全国范围内进行了多中心临床试验， 1. 本课题全国共86个单位参加， 2. 样本量相对比较大，共检测8443例宫颈细胞学样本，这8443同时做FISH检测和TCT检测，统计分析宫颈液基细胞学检查与hTERC基因异常扩增相关性 。 3. 其中7271例同时组织病理学检查和hTERC基因异常扩增情况，统计分析其相关性。 实体瘤的检测当中FISH检测技术正在越来越多的得到应用，并且FISH检测再诊断治疗的过程中所占的位置也越来越重要。 临床应用 大手术病人，骨科手术病人，肿瘤病人，长期卧床病人和长途飞行者，如携带F5基因突变，易发生肺、脑梗死意外。 尿路肿瘤微卫星片段分析 根据WHO尿路上皮癌诊断标准，按照遗传学稳定和不稳定把尿路癌分为浸润型和非浸润型，依据中国，日本等亚洲国家遗传学特点，设计了D9S283、D9S162、IFNA、D4S243、D17S695、D9S171、TGFbRⅡ，BAT25，BAT26微卫星位点，由Applied Biosystems公