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【生态学研究仪器设备技术】 * * 【生态学实验】 一、叶绿素荧光分析技术 在植物生理生态研究中的应用 ◇绿色植物健康的叶片经一段时间的暗处理后突然照光,激 发态的叶绿素分子能发出暗红色的荧光,叶绿素的这种光效应称为荧光效应。 ◇叶绿素的荧光是在PSII反应过程释放的,其强度与光照强度成正比,并且随时间不断变化,这种现象称为荧光感应(Kautsky感应)。 ◇荧光随时间变化的曲线称为叶绿素荧光诱导动力学曲线。 (一)、叶绿素的荧光现象 (二)PEA植物效率分析仪的使用 1、仪器用途 植物效能分析仪(PEA)是一种野外手持式持续激发型的叶绿素荧光分析仪。它提供了标准水平的激发能量和光速探测系统来精确测定荧光感应(Kautsky感应),并自动计算出荧光感应的各种有价值的参数,是研究植物光合作用中光化学过程的重要工具。 2、工作原理: ◇植物所吸收的光能并不能被植物光合作用完全利用,其中一部分能量以荧光的形式释放到环境中去,这就是叶绿素荧光。 ◇当叶子处在黑暗中一段时间后,突然受到光线照射时,叶绿素立即发生荧光感应。荧光感应强度与光合作用效率密切相关。 PEA植物效能仪可以检测到微弱的荧光感应,并且通过微电脑计算出各种生理参数。 ◇PEA植物效能仪具有很高的分辨率,每秒钟能够测定10万次荧光变化,因此是研究光合作用中电子传递瞬间变化的有力工具。 3、主要荧光参数及其意义 Fo ---- 初始荧光产量(Original fluorescence yield ) 也称基础荧光,是PSⅡ反应中心(经过充分 暗适应以后)处于完全开放状态时的初始荧光产量。 Fm ----最大荧光产量(Maximal fluoreseence yield ), 是PSⅡ反应中心完全关闭时的荧光产量。 通常叶片经暗适应20min后测得。 Fv=Fm-Fo ----可变荧光,反映PSⅡ的电子传递最大潜力。 经暗适应后测得。 Fv/Fm ---- PSⅡ量子产量,代表暗适应下PSⅡ反应中心完全开放时的最大 光化学效率,反映PSⅡ反应中心最大光能 转换效率。 Fv/Fo -----光化学活性,代表PSⅡ潜在光化学活性,与有活性的反 应中 心的数量成正比关系。 Ft----------稳态荧光产量 (或Fs ) 。 φPSⅡ----PSⅡ量子效率,它反映在照光下PSⅡ反应中心部分关闭的 况下的实际光化学效率(φPSⅡ =(Fm’-Fs)/Fm’ )。 qP ---------光化学猝灭系数, 它反映了PSⅡ反应中心的开放程度 ( qP =(Fm’ -Fs)/(Fm’-Fo’) )。 (三)、叶绿素荧光动力学研究得到广泛应用 其原因: 1、叶绿素荧光动力学特性包含着光合作用过程的丰富信息 ●光能的吸收与转换 ●能量的传递与分配 ●反应中心的状态 ●过剩光能及其耗散 ●光合作用光抑制与光破坏……等等 2、可以对光合器官进行“无损伤检测”,获得 “原生态”的 信息。 (四)、测定叶绿素荧光诱导动力学曲线的意义 1、在植物生理生态学研究中,测定不同生态环境条件下的叶绿素荧光变化,了解逆境(如干旱、低温、高温、盐害、酸雨等)条件对植物光合作用的影响。 2、在农业科学研究中,通过植物叶绿素荧光测定,可选择植物适宜的生长环境,排除对光合作用产生抑制作用的环境条件。 3、在大气污染及全球变化的研究中,通过对植物叶绿素荧光的测定,可了解大气污染物对叶绿体破坏程度,同时也可了解到对光合作用的影响。 快速叶绿素荧光诱导动力学的应用O,I,J,P诱导曲线的分析 O,I,J,P 曲线包含巨大的信息,是研究植物光合机构功能的有力工具 o 【生态学研究仪器设备技术】 *
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