生物化学第二篇习题教程.pptVIP

* 第二篇要点 1、酶的化学本质：蛋白质或RNA 2、酶促反应和非酶促反应的异同 3、能用“锁和钥匙”模型、“诱导契合”模型、“三点附着”模型和“四点着陆”模型解释酶作用的专一性，掌握什么是活性中心以及活性中心的性质。 4、了解影响酶促反应速率的因素，明确最适pH和最适温度的概念。 5、能推导米氏方程，记住米氏方程成立的三个条件。 6、掌握酶的可逆性抑制剂和不可逆性抑制剂的类型和抑制机制。 7、能使用双倒数作图方法区分竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂和反竞争性抑制剂。 8、酶稳定过渡态的几种机制：广义酸碱催化、静电催化、金属催化、共价催化和底物变形。 9、掌握丝氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶的催化机制。 10、酶活性的物种“质变”调节机制：别构调节、共价修饰、水解激活、调节蛋白作用和单体/多聚体的互变。 11、正确区分酶的别构效应和协同效应，能用齐变学说和序变学说解释别构酶的作用机制和酶的协同效应。 9、酶的抑制剂可分为可逆性抑制剂和不可逆性抑制剂。可逆性抑制剂以次级键与酶可逆性结合，使用透析或超滤就可除去，使酶恢复活性；不可逆性抑制剂以强的化学键与酶结合，导致酶的有效浓度降低。 10、竞争性抑制剂不改变Vmax，但能提高Km；非竞争性抑制剂不改变酶的Km，降低Vmax；反竞争性抑制剂能降低酶的Km，降低Vmax。与不可逆性抑制剂动力学曲线相似的可逆性抑制剂是非竞争性抑制剂。 11、基团特异性抑制剂在结构上与底物无相似之处，但能共价修饰酶活性中心上的必需侧链基团而导致酶活性不可逆的失活；自杀性抑制剂是受酶自身激活的不可逆性抑制剂。 12、别构酶除了含有活性中心以外，还有别构中心。一种典型的别构酶的反应速率对底物浓度曲线为S形，对竞争性抑制剂的作用表现为双相反应。 13、被酶学家用来解释各种酶的催化机制学说是过渡态稳定学说，。相关的催化策略包括邻近定向效应、广义的酸碱催化、静电催化、金属催化、共价催化和底物形变。形成酶与底物共价中间物的手段主要是亲核催化 ，也有亲电催化。 14、所有的蛋白酶在催化过程中都经历四面体的过渡态，该过渡态形成的原因是一个亲核基团进攻肽键的羰基碳。 15、可使用齐变学说和序变学说解释别构酶的动力学行为，这两种学说都认为酶具有T态和R态，活性高的是R态。不能解释负协同效应的学说是齐变学说。 16、能改变酶活性的共价修饰是磷酸化、乙酰化、甲基化、核酸酸化等，仅发现在某些原核生物的共价修饰形式是核算酸化。 17、测定酶促反应速率要保证反应条件为最适条件，反应速度为初速度和底物浓度过量。测定酶活力的方法有直接测定法、间接测定法和偶联测定法。 18、具有抗氧化性的三种维生素是A、C和E，可视为激素的两种维生素是A和D，不能作为辅酶或辅基的维生素是A、D和E。 判断题 1、一种酶的最适pH、最适温度以及其对某种底物的Km值都是酶的特征常数。（错） 2、随着反应的进行，竞争性抑制剂的抑制效果会越来越强。对 3、酶的竞争性抑制剂总是通过与活性中心的结合，来抑制酶促反应。错 4、行使广义酸碱催化的酶的催化效率不依赖于缓冲溶液的浓度。错 5、酶底物的类似物和过渡态类似物通常都是酶的竞争性抑制剂。错 6、酶促反应的过渡态是酶促反应多种中间的一种。错 7、可使用“锁和钥匙”和“诱导契合”两种学说解释酶的催化机制。错 8、较低浓度的竞争性抑制剂通常能够激活别构酶。对 9、别构酶总是寡聚酶。错 10、具有协同效应的酶就是别构酶。错 11、如果一种酶活性中心的氨基酸残基在一定pH范围内的解离性质不发生变化，那么在这一段pH范围内，酶促反应速率不受pH变化的影响。错 12、维生素K又名抗凝血维生素。错 13、丙氨酸侧链没有活性基团能参与酶的催化，因此它不可能出现在活性中心。错 14、一种酶的最适pH和最适温度都不是酶的特征常数。对 15、底物引进一个基团后，引起酶与底物结合能增加，此时酶催化反应速率增大，其主要原因是增加的结合能被用来降低Km。错 问答题 1、尽管RNA也可以充当生物催化剂，但已发现的核酶很少存在广义的酸碱催化机制，另外核酶催化的反应十分有限。为什么？ 答：RNA没有类似于His侧链基团的可解离基团，即缺乏pKa。接近中性的侧链基团，难以像蛋白质酶一样借助于His可以作为质子供体或受体的特性行使广义的酸碱催化。另外，构 成RNA只有四种核苷酸残基，而构成蛋白质的有20多种氨基酸残基，由于缺乏更多种类的侧链基团，使得核酶在活性中心上缺乏多样化的催化残基，其催化的反应类型受到限制。 2、使用定点突变技术可将单个氨基酸的取代引入一个蛋白质分子中。如果你将一种酶分子上特定位置的K取代D，当在将一系列突变分子分离纯化以后，进行动力学分析。下表是分析结果： 酶形式 酶活性μmol产物/mg酶 野生型酶 1000 K21 D21突