发酵过程控制与研究教学.ppt

一、氧在微生物发酵中的作用 （1）氧是构成微生物细胞本身及其代谢产物的组分之一。 （2）氧还可以作为中间体直接参与一些生物合成反应。如乙醇在氧的作用下合成乙酸。 注意：在好氧发酵中，溶解氧是重要的参数之一，但溶解氧并不是越大越好。 （1）溶氧的大小对菌体生长和产物合成都会产生不同影响。如谷氨酸发酵、薛氏丙酸菌发酵生产产维生素B12 。 （2）需氧发酵并不是溶氧愈大愈好，适当高的溶氧水平有利于菌体生成和产物合成，但溶氧太大有时反而抑制产物的形成 ，即溶氧有一个最低限度外，还有一个最高限度。 因此，要掌握临界溶氧浓度和最适溶氧浓度，使发酵过程保持在最适溶氧浓度。 最适溶氧浓度的高低与菌种和产物合成途径有关，这是由实验确定的。例如初级代谢产物氨基酸的发酵，根据发酵需氧要求不同，可分为三类： a. 供氧充足条件下产量最大；若供氧不足，合成强烈受抑制； 如：谷氨酸，精氨酸，脯氨酸等 b.供氧充足条件下可得最高产量；若供氧受限，产量受影响不明显； 如：异亮氨酸，赖氨酸，苏氨酸等 c.仅供氧受限，细胞呼吸受抑制时，才获得最大量产物；若供氧充足，产物形成反而受抑制； 如：亮氨酸，缬氨酸，苯丙氨酸等 另外： 不同种类的微生物需氧量不同； 同种微生物需氧量随菌龄和培养条件不同而不同； 菌体生长和产物合成时的需氧量也不同 二、微生物的耗氧特征 微生物对氧的需求主要受菌体代谢活动变化的影响，常有耗氧速率和呼吸强度两种方法表示。 耗氧速率：指单位体积培养液在单位时间内的 耗氧量，以r表示，也称摄氧率。呼吸强度：指单位质量菌体在单位时间内的 耗氧量，以QO2表示。 r = QO2X 式中 ： X—菌体浓度 由上式可知，微生物在发酵过程中的耗氧速率取决于微生物的呼吸强度和单位体积发酵液的菌体浓度，而菌体呼吸强度又受菌龄、菌种性能、培养基及培养条件等诸多因素的综合影响。 三、影响微生物耗氧的因素 1、分批发酵过程中细胞耗氧的一般规律，见图。 以上是呼吸强度和摄氧率变化的一般规律，但这一规律受到以下因素的影响和限制。 2、影响微生物耗氧的因素 （1）微生物本身遗传特征 不同种类的微生物耗氧量不同；同种微生物耗氧量随菌龄和培养条件不同而不同；菌体生长和产物合成时的耗氧量也不同。 一般幼龄菌生长旺盛，呼吸强度大，但发酵初期由于菌体浓度低，所以总耗氧量低；老龄菌的呼吸强度弱，但发酵中后期菌体浓度大，所以耗氧量高。 （2）培养基的成分和浓度 培养基的成分尤其是碳源种类对细胞的耗氧量影响很大。耗氧速率由大到小为：油脂或烃类＞葡萄糖＞蔗糖＞乳糖。 培养基的浓度也会影响细胞的耗氧速率。浓度大细胞代谢旺盛，耗氧增加；浓度小，如碳源成为限制性基质时，呼吸强度下降，补料后呼吸强度又上升。 若培养基中含有生长抑制剂时，呼吸强度也会受到限制。 （3）菌龄 一般幼龄菌生长旺盛，呼吸强度大；老龄菌生长慢，呼吸强度小。 （4）发酵条件 pH、温度通过对酶活性的影响而影响菌体细胞的耗氧，而且温度还影响发酵液中的溶氧浓度，温度升高溶氧浓度下降。一般在最适条件下发酵，耗氧量最大。 （5）代谢类型 若产物是通过TCA循环获得，则呼吸强度高耗氧量大；若产物是通过EMP途径获得，则呼吸强度低耗氧量小。 四、控制溶氧的意义 1. 溶氧浓度对细胞生长和产物合成的影响不同，及对于细胞生长的最适溶氧浓度并不一定是产物合成的最佳溶氧浓度，也就是发酵不同阶段需要控制不同的溶氧浓度。 2. 由于空气中的氧在发酵液中的溶解度很低，所以发酵工业中给发酵液通气时空气中氧的利用率很低。大量经过净化处理的无菌空气在给发酵液通气过程中因溶解少被浪费掉，因此必须设法提高传氧效率，从而大大降低空气消耗量，降低设备费用和动力消耗，提高设备利用率，而且减少泡沫形成和染菌， 6.4.2 发酵过程中的溶氧变化 一、发酵过程中溶氧浓度变化的一般规律 发酵前期：由于微生物大量繁殖，需氧量不断大幅度增加，此时需氧超过供氧，溶氧明显下降 发酵中期：溶氧浓度明显地受工艺控制手段的影响，如补料的数量、时机和方式等 发酵后期：由于菌体衰老，呼吸减弱，溶氧浓度也会逐步上升，一旦菌体自溶，溶氧就会明显地上升 二、溶氧异常的原因 1、引起溶氧异常下降的可能原因 （1）污染好气性杂菌，消耗大量溶氧，使溶氧在短时间内下