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[医学]第10章DNA复制.ppt

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[医学]第10章DNA复制

第十章 DNA的生物合成 Chapter 10 Biosynthesis of DNA DNA是由四种脱氧核糖核苷酸所组成的长链大分子,是遗传信息的携带者。 生物体的遗传信息就贮存在DNA的四种脱氧核糖核苷酸的排列顺序中。 DNA dependent DNA polymerase棗DDDP DNA dependent RNA polymerase棗DDRP RNA dependent RNA polymerase棗RDRP RNA dependent DNA polymerase棗RDDP 中心法则 第一节 复制的基本规律 一、半保留复制 DNA在复制时,以亲代DNA的每一股作模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为DNA的半保留复制(semi-conservative replication)。 半保留复制的意义在于子代保留了亲代的全部的遗传信息,其体现在于代与代之间DNA碱基序列的一致性上。 base pairing during DNA synthesis Parental DNA strands Daughter DNA strands 亲代DNA 子代DNA 母链 子链 亲代DNA的两条链,都作为复制的模板(母 链),严格遵从碱基互补原则合成两条新链(子链), 以构成两个子代DNA。子代DNA中有一半直接从亲代 保留下来,只有一半是新合成的。 半保留复制是遗传的分子基础。 DNA以半保留方式进行复制,是在1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 所完成的实验所证明。该实验首先将大肠杆菌在含15N的培养基中培养约十五代,使其DNA中的碱基氮均转变为15N。将大肠杆菌移至只含14N的培养基中同步培养一代、二代、三代。分别提取DNA,作密度梯度离心,可得到下列结果: 亲代DNA分子 第一子代分子 第二子代分子 15N-DNA 14N-DNA 混合 1   2   3 DNA半保留复制及实验依据 二、有一定的复制起始点 DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段,即复制起始点。在原核生物中,复制起始点通常为一个,而在真核生物中则为多个。E.coli复制起点oriC跨度为245 bp 三、需要引物 参与DNA复制的DNA聚合酶,必须以一段具有3挾俗杂婶腔??OH)的RNA作为引物(primer) ,才能开始聚合子代DNA链。 RNA引物的大小,在原核生物中通常为50~100个核苷酸,而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物的碱基顺序,与其模板DNA的碱基顺序相配对。 四、双向复制 DNA复制时,以复制起始点为中心,向两个方向进行复制。但在低等生物中,也可进行单向复制(如滚环复制)。 DNA从起始点向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制。 复制起点 复制叉 复制子 五、半不连续复制 由于DNA聚合酶只能催化底物的5?P 加合到延长中子链的3-OH上生成磷酸二酯键,决定了延长具有方向性。新链的生成方向只能从5 ?? ⅰ<匆?→3方向聚合子代DNA链,即模板DNA链的方向必须为3→5。因此,分别以两条亲代DNA链作为模板聚合子代DNA链时的方式是不同的。 以3→5方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基本上是连续进行的,其子代链的聚合方向为5→3,这一条链被称为领头链(leading strand)。而以5→3方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时则是不连续的,其链的聚合方向也是5→3,这条链被称为随从链(lagging strand)。 由于亲代DNA双链在复制时是逐步解开的,因此,随从链的合成也是一段一段的。DNA在复制时,由随从链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazaki fragment)。 冈崎片段的大小,在原核生物中约为1000~2000个核苷酸,而在真核生物中约为100个核苷酸。 第二节 DNA复制的酶学和拓扑学变化 模板 单股DNA母链 底物 dATP ,dGTP dCTP ,dTTP 引物 RNA 酶及其它辅助因子 解旋酶,拓扑酶 单链结合蛋白 引物酶,引发体 聚合酶,连接酶 一.复制所需的物质: 二. 复制的化学反应 磷酸二酯键

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