[医学]第10章DNA复制.ppt

第十章 DNA的生物合成Chapter 10 Biosynthesis of DNA DNA是由四种脱氧核糖核苷酸所组成的长链大分子，是遗传信息的携带者。 生物体的遗传信息就贮存在DNA的四种脱氧核糖核苷酸的排列顺序中。 DNA dependent DNA polymerase棗DDDP DNA dependent RNA polymerase棗DDRP RNA dependent RNA polymerase棗RDRP RNA dependent DNA polymerase棗RDDP 中心法则 第一节 复制的基本规律 一、半保留复制 DNA在复制时，以亲代DNA的每一股作模板，合成完全相同的两个双链子代DNA，每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链，这种现象称为DNA的半保留复制(semi-conservative replication)。 半保留复制的意义在于子代保留了亲代的全部的遗传信息，其体现在于代与代之间DNA碱基序列的一致性上。 base pairing during DNA synthesis Parental DNA strands Daughter DNA strands 亲代DNA 子代DNA 母链 子链 亲代DNA的两条链，都作为复制的模板（母 链），严格遵从碱基互补原则合成两条新链（子链）， 以构成两个子代DNA。子代DNA中有一半直接从亲代 保留下来，只有一半是新合成的。 半保留复制是遗传的分子基础。 DNA以半保留方式进行复制，是在1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 所完成的实验所证明。该实验首先将大肠杆菌在含15N的培养基中培养约十五代，使其DNA中的碱基氮均转变为15N。将大肠杆菌移至只含14N的培养基中同步培养一代、二代、三代。分别提取DNA，作密度梯度离心，可得到下列结果： 亲代DNA分子 第一子代分子 第二子代分子 15N-DNA 14N-DNA 混合 1　　　2　　　3 DNA半保留复制及实验依据 二、有一定的复制起始点 DNA在复制时，需在特定的位点起始，这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段，即复制起始点。在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。E.coli复制起点oriC跨度为245 bp 三、需要引物 参与DNA复制的DNA聚合酶，必须以一段具有3挾俗杂婶腔??OH）的RNA作为引物(primer) ，才能开始聚合子代DNA链。 RNA引物的大小，在原核生物中通常为50～100个核苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物的碱基顺序，与其模板DNA的碱基顺序相配对。 四、双向复制 DNA复制时，以复制起始点为中心，向两个方向进行复制。但在低等生物中，也可进行单向复制（如滚环复制）。 DNA从起始点向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 复制起点 复制叉 复制子 五、半不连续复制 由于DNA聚合酶只能催化底物的5?P 加合到延长中子链的3-OH上生成磷酸二酯键，决定了延长具有方向性。新链的生成方向只能从5 ?? ⅰ＜匆?→3方向聚合子代DNA链，即模板DNA链的方向必须为3→5。因此，分别以两条亲代DNA链作为模板聚合子代DNA链时的方式是不同的。 以3→5方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基本上是连续进行的，其子代链的聚合方向为5→3，这一条链被称为领头链(leading strand)。而以5→3方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时则是不连续的，其链的聚合方向也是5→3，这条链被称为随从链(lagging strand)。 由于亲代DNA双链在复制时是逐步解开的，因此，随从链的合成也是一段一段的。DNA在复制时，由随从链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazaki fragment)。 冈崎片段的大小，在原核生物中约为1000～2000个核苷酸，而在真核生物中约为100个核苷酸。 第二节 DNA复制的酶学和拓扑学变化 模板 单股DNA母链 底物 dATP ，dGTP dCTP ，dTTP 引物 RNA 酶及其它辅助因子 解旋酶，拓扑酶 单链结合蛋白 引物酶，引发体 聚合酶，连接酶 一.复制所需的物质： 二. 复制的化学反应 磷酸二酯键