重温经典引领创新——金品服务科研-全式金.PDFVIP

重温经典、引领创新 ——“金品”服务科研 北京全式金生物技术有限公司 • “Easy”克隆技术——快速、高效“1+1” • “TransStart”——最好的热启动技术 • “TransStart FastPfu”——快速高保真酶 • “TransDirect PCR” ——无需纯化gDNA的PCR • “All-in-One”——简单到极致的反转录 • “EasySee”—— Western Blot可视化 • “TransLipid”——新型转染试剂 • “Double Luciferace”—报告基因检测的生力军 研发指导理念 原理创新，使用便捷——“Fast 、Easy” “TransStart”热启动技术 开发思路 PCR酶性能 扩增能力；特异性；保真性。 扩增能力，特异性方面，热启动酶的效果最好。 开发思路 热启动方法 化学封闭、抗体封闭、基因改造。 共同特点：封闭DNA 聚合酶的活性中心，常温下酶活受限， 加热后释放酶活。 DNA 聚合酶活性中心不只一个，所以无法完全封闭酶活。 不同热启动方法比较 化学封闭法 抗体封闭法 基因改造 (HotStar (Platinum (TransTaq-T、 Qiagen) IVTG) TransTaq HiFi TransGen) 需要预加热（10 min） 利用Taq抗体（来源于 不使用抗体，无需预加热。 步骤，损伤DNA 样品， 哺乳动物），有残留 降低酶活。 DNA污染的潜在风险。 酶的催化活性域不唯一，改 造后的酶仍然无法100%封闭 酶的催化活性域不唯一，酶的催化活性域不唯一 酶活。 无法100%封闭酶活。 ，无法100%封闭酶活。 开发思路 反其道而行之 ——不针对酶本身进行封闭，而是封闭引物与模板，让酶 的活性无用武之地？ 如何封闭？ “TransStart”热启动原理——双封闭法 利用两种高效的蛋白，分别与引物和模板结合，阻断低温下 引物形成二聚体、以及阻断酶与模板的结合，使引物与模板不 被DNA polymerase所利用，有效地封闭DNA 的合成。高效小 蛋白相对模板引物过量，封闭效率达100%。 随PCR变性步骤的进行，两种蛋白失活，释放出引物与模板 参与扩增反应。 “TransStart”双封闭法原理 “TransStart”热启动技术的应用 TransStart Taq DNA Polymerase 新型热启动酶——双封闭法，提高扩增能力，增强扩 增特异性 TransStart Taq 扩增能力和特异性比较 M 1 2 3 4 M:Trans2K Plus DNA Marker 1:DMD1, 0.3kb 2:Numb, 0.3kb 3:P53, 0.5kb 4:P1P2, 1.2kb 左道为非热启动Taq DNA聚合酶