[工学]第4讲 分子发光分析法.pptVIP

第四讲 分子发光分析法 一、分子荧光与磷光产生过程 luminescence process of molecular fluorescence phosphorescence 二、激发光谱与荧光光谱 excitation spectrum and fluore-scence spectrum 三、荧光的产生与分子结构关系 relation between fluorescence and molecular structure 四、影响荧光强度的因素 factor influenced fluorescence 一、荧光与磷光的产生过程 luminescence process of molecular fluorescence phosphorescence 2.电子激发态的多重度 3.激发态→基态的能量传递途径 （1）非辐射能量传递过程（非辐射跃迁） （2）辐射能量传递过程（辐射跃迁） （3）荧光与磷光的根本区别： 荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的； 而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。 二、激发光谱与荧(磷)光光谱（发射光谱） excitation spectrum and fluore-scence spectrum 2.荧光光谱(或磷光光谱) 3.激发光谱与发射光谱的关系 三、荧光的产生与分子结构的关系 （实际上只有很少的有机分子能发射荧光） 若用数学式来表达这些关系，得到 ?= kf /（kf+?ki） 式中kf为荧光发射过程的速率常数，?ki为其它有关过程的速率常数的总和。 凡是能使kf 值升高而使其它ki值降低的因素，都可增强荧光。 2.化合物的结构与荧光 四、影响荧光强度的因素 relation between fluorescence and molecular structure 4.内滤光作用和自吸现象 5.溶液荧光的猝灭（P95） ③ 转入三重态的猝灭 分子由于系间的跨越跃迁，由单重态跃迁到三重态。转入三重态的分子不发射荧光而使荧光猝灭。 ⑤ 荧光物质的自猝灭 在浓度较高的荧光物质溶液中，单重激发态的分子在发生荧光之前和未激发的荧光物质分子碰撞而引起的自猝灭。 有些荧光物质分子在溶液浓度较高时会形成二聚体或多聚体，使它们的吸收光谱发生变化，也引起溶液荧光强度的降低或消失。 五、荧光光谱仪 仪器光路图 磷光检测（磷光光谱仪） 六、分子荧光分析法及其应用 2.定量依据与方法 （2）定量方法 3.荧光分析法的应用 4、磷光分析法的应用 分子发光分析法教学要求 掌握分子荧光、磷光的产生机理； 掌握激发光谱和发射光谱特征。 掌握荧光与分子结构的关系以及溶液荧光（磷光）强度的影响因素。 了解荧光（磷光）分析法的特点。 了解荧光（磷光）分析仪器的结构。 P99 以后的内容了解即可，不要求掌握 (1)无机化合物的分析 与有机试剂形成配合物后测量，可测量20多种元素。 铍、铝、硼、镓、硒、镁、稀土常采用荧光分析法； 氟、硫、铁、银、钴、镍采用荧光熄灭法测定； 铜、铍、铁、钴、锇及过氧化氢采用催化荧光法测定； 铬、铌、铀、碲采用低温荧光法测定； 铈、铕、锑、钒、铀采用固体荧光法测定 (2)生物与有机化合物的分析 主要为具有共轭体系的芳香族化合物，见表。 1.稠环芳烃分析 采取固体表面室温磷光分析法快速灵敏测定稠环芳烃和杂环化合物（致癌物质）；见表 2.农药、生物碱、植物生长激素的分析 烟碱、降烟碱、新烟碱等分析 检测限0.01 ?g/ml 3.药物分析和临床分析 见下表 * * 第一节 分子荧光与磷光 molecular luminescenceanalysis molecular fluorescence and phosphorescence 1. 分子能级与跃迁 在每个电子能级上，都存在振动、转动能级； 基态(S0)→激发态(S1、S2、激发态振动能级)：吸收特定频率的辐射；量子化；跃迁一次到位； 激发态→基态：多种途径和方式(见能级图)；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势 S2 S1 S0 T1 吸 收 发 射 荧 光 发 射 磷 光 系间跨越 内转换 振动弛豫 能 量 l 2 l 1 l 3 外转换 l ?2 T2 内转换 振动弛豫 电子激发态的多重度：M=2S+1 S为电子自旋量子数的