Bacteriaandphagegenetics(细菌及噬菌体遗传学)(PPT).pptVIP

细菌的三种遗传转移 转化(Transformation): 供体细胞(donor cell )通过裂解释放DNA后，被受体细胞( recipient cell)吸收的过程。 接合(Conjugation): 两个细菌细胞相互接触转移DNA的过程。 转导(Transduction): 细菌病毒(如噬菌体)通过供体细胞向受体细胞转移DNA的过程。 三种遗传转移的区别 细菌转化(Bacterial transformation) 转化是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的DNA而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。 首次由 Frederick Griffith 在1928年观察到, 1944年， Oswald Avery 实验表明DNA负责细菌的转化。 自然转化 人工转化 在自然条件下发生转化的细菌较少，大多数细菌的转化都出现在非自然条件下，包括大肠杆菌 E. coli. 一些细菌能在特殊的化学或温度处理条件下发生转化，也可以用电击处理使其发生转化。 感受态细胞（competent cells）：在一个细菌群体中，只有处在特殊生理状态的一些细胞才能吸收DNA。称之为感受态细胞。 细菌接合(Bacteria conjugation) 1946 年Joshua Lederberg 和Edward Tatum首次发现 1. 两个不同营养缺陷型菌株 (auxotrophic) 可能交换遗传物质形成原养型菌株( prototrophic)。 2. 需要两个不同细菌的接触. 细菌的接合是由 F因子介导的 1953年, William Hayes 表明细菌的遗传交换是单向的，遗传的转移是由一个称为性因子或致育因子的F因子介导的。 质粒(plasmid): 独立与细菌染色体能独立自我复制的环状DNA。 F因子：F因子是一个独立的自我增殖的环状DNA分子，它可以转移，是一个质粒。 F因子携带的基因可以指导接合管的形成，并自我复制，转移到受体F- 细菌中，使F- 细菌变成F+。 F-菌株：不携带F因子的细菌称F- F+菌株：携带F因子的细菌称F+ Hfr 菌株形成及特点 高频重组菌株(high-frequency recombination strains)：F因子能以较高的频率和细菌染色体发生重组，并整合到细菌染色体上，这样的菌株称Hfr菌株。 William Hayes and Luca Cavalli-Sforza分别分离了Hfr菌株 Hfr 可以通过F因子和细菌染色体的交换整合到细菌染色体中 交换发生在插入序列中(IS)。 接合常会出现中断，只有部分的细菌染色体被转移，受体细胞仍保持为F-，因为F因子仍留在供体内。 F因子位于Hfr染色体的最后端，极少进入。因此 Hfr × F-接合时，F-细菌很少转变成Hfr。 可以通过每一个基因被转移进入受体的时间作图，定位基因在染色体上的位置。 基因被转移的顺序不同而形成不同的Hfr 菌株，如 Hayes和 Cavalli-Sforza所分离的菌株 HfrH and HfrC 转移后的受体细胞是一个部分二倍体 部分二倍体(partial diploid)：指Hfr 菌株和F-在接合过程中，接合中断，供体Hfr 菌株部分基因组和F-菌株完整基因组重组所形成的重组体。 中断杂交试验--细菌基因组作图 细菌基因组作图特点 定位基因的单位是时间。 最靠近F因子插入位置（IS）的基因最先被转移。 不同的 Hfr 菌株F因子插入的位置不同。 任何一个基因都可以用几个Hfr 菌株定位。 性导与F’因子 单交换产生不平衡的线性染色体，是没有意义的。 双交换产生正常的重组环状个体和线性片段，不平衡的线性片段丢失，因此只有正常的重组个体。 细菌重组特点 F+ × F- F+ Hfr × F- F- F+细胞和F-细胞之间的杂交只有F因子的传递而细菌的染色体并不转移，因此尽管F因子转移频率很高，但两者染色体之间重组频率很低，大约为10-7，因此F+品系称为低频重组。 Hfr细胞与F-细胞接合后可以将供体染色体的一部分或全部传递给F-受体，当供体和受体的等位基因带有不同标记时，在它们之间发生重组，重组频率为10-4，故称高频重组品系（Hfr）。 两类杂交的比较 把Hfr菌株与F-菌株混合在一起进行杂交培养，每隔一定时间取样，把菌液放在搅拌器内搅拌，以中断杂交。经过稀释，接种到含有链霉素的完全培养基上，这样将杀死所有对链霉素敏感的Hfr细胞，然后对形成菌落的F-细胞用影印培养法测试其基因型，以便确定每个基因转移到F-细胞的时间。 F′ factor 1959年，E.H. Adelberg和Burus发现一些品系的Hfr又恢复成F+状态，但其F factor上整合了宿主