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乳汁HBV标志物检测对乙肝产妇哺乳的指导价值 中国实验诊断学2010年5月第14卷第5期 文章编号:1007—4287(2010)05—0759—02 __.?—— 759?---—— 乳汁HBV标志物检测对乙肝产妇哺乳的指导价值 陈铭,艾彪,何翰,董虹,谢良才,周铭 (荆州市第一人民医院检验科,湖北荆州434000) 我国是乙型肝炎流行高发区,HBSAg阳性人17I 约占人口10%一15%.世界卫生组织提倡母乳喂 养,但母婴传播是乙肝病毒(HBV)主要的传染途径 之一,对乙型肝炎病毒携带者能否母乳喂养国内尚 有争议.本研究应用荧光定量聚合酶链式反应(FQ— PCR)和酶联免疫吸附试验试验(ELISA)技术对我院 血清HBSAg阳性产妇进行血清和乳汁HBV—DNA及 HBV免疫血清学标志物(HBV.M)检测,并对结果及 其相关性和对乙肝产妇哺乳的指导价值进行分析. 1资料和方法 1.1研究对象选择2007年1O月至2008年11月 本院产科血清HBsAg阳性和A正常分娩的产妇 116例,为乙肝病毒携带产妇,年龄20—34岁;健康 对照产妇30例,年龄21—30岁. 1.2实验方法 1.2.1检测试剂HBV血清学酶联免疫检测试剂盒 购于上海科华生物技术有限公司;HBV—DNA荧光定 量PCR检测剂盒购于广州达安生物技术有限公司. 1.2.2检测仪器酶联免疫检测用酶标仪为郑州 安图2010酶标仪,洗板机为郑州安图ANTHOSFIUI— DO自动洗板机;HBV.DNA荧光定量PCR试验使用 美国ABI7500定量PCR仪. 1.2.3方法HBV血清学标志物使用ELISA检测 方法,HBV.DNA采用实时荧光定量聚合酶链反应 法.乳汁标本检测必须进行前处理程序,方法为将 留取的乳汁标本4℃冰箱过夜,从中间层吸取乳汁 750tzl进行ELISA检测;VQ—PCR检测时在样本中加入 等量100g/LPEG液混合,4℃150130r/min离心15 min,弃上清液,加入50灭菌双蒸水充分溶解沉淀, 加入等量DNA提取液混匀.血清及乳汁后续检测操 作及结果判读均按仪器和试剂盒说明书执行. 1.3统计学处理采用SAS统计软件进行数据统 计处理,阳性率采用百分率(%)表示,数据比较采用 检验进行分析,血清HBV—DNA与乳汁HBV—DNA 含量相关性分析采用相关性检验. 2结果 2.1乙肝免疫血清学标志物检查结果116例乙 肝病毒携带产妇检测结果见表1,HBsAg,血清与乳 汁差异显着(Plt;0.05),其他免疫学标志物HBeAg, HBsAb,HBeAb,HBcAb前S1抗原无显着差异(Pgt; 0.05).以血清HBsAg,HBeAg阳性为大三阳组,血 清HBsAg,HBsAb阳性为小三阳组,乳汁的HBV.M 结果见表2,大三阳组乳汁HBsAg明显高于小三阳 组(Plt;0.01).对照组血清与乳汁均无阳性结果. 表1乙肝病毒携带产妇血清与乳汁ItBV-M检测结果 表2血清rmeAg阳性组与阴性组产妇乳汁中HBV-M阳性检出率比较 2.2乙肝病毒DNA(HBV.DNA)检测结果血清 HBV—DNA阳性例数为50例,阳性率为43.1%;乳汁 HBV—DNA阳性例数为38例,阳性率为32.8%,两者 无显着差异(Pgt;0.05).若以血清HBeAg阳性为大 三阳组,血清HBeAb阳性为小三阳组,两组的乳汁 及血清的HBV.DNA检测结果见表3.大三阳组血 清HBV—DNA检出41例,阳性率97.6%,乳汁HBV. DNA检36例,阳性率85.7%,二者无显着性差异(P gt;0.05);小三阳组血清HBV—DNA检出9例,阳性率 12.1%,乳汁HBV—DNA检2例,阳性率2.7%,二者有 ----—— 760??-—— 显着性差异(Plt;0.05).血清HBV—DNA含量与乳汁 HBV—DNA检出率见表4,血清HBV.DNA含量与乳汁 HBV.DNA含量呈正相关(r=0.864,Plt;0.05). 表3大三阳组与小三阳组产妇血清 与乳汁HBV-DNA检测结果比较 血清HBV.DNA含量例数乳汁HBV-DNA阳性数阳性率 3讨论 乙肝病毒在母婴垂直传播一般有3种途径,一是 妊娠时经胎盘宫内感染,二是分娩时胎儿经过产道, 可吞进羊水,血,阴道分泌物引起感染,三是密切接触 或母乳喂养时经过乳汁进行传播_1,2J乙肝病毒经母 乳传播的问题一直引起关注,由于幼儿的免疫功能并 不完善,其消化道任何一处有炎症或破损时,母乳中 的HBV就可能侵入血液循环引起感染l_3_3. HBV免疫血清学标志物中HBsAg,HBeAg阳性 通常被认为是乙肝病毒感染的证据,其中HBeAg阳 性被认为是强传染性的标志.近年,乙肝病毒前s1 抗原(Pre.S1)被逐步认