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- 2018-03-09 发布于福建
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学习目标:1.格里菲思的肺炎双球菌体内、体外转化实验的过程及结论
2.噬菌体侵染大肠杆菌实验的方法、过程及结论
3.证明DNA是遗传物质实验的设计思路
4.生物类型与遗传物质类型的关系
5.DNA粗提取的原理和过程
[教材梳理]
一、肺炎双球菌转化实验
1.肺炎双球菌
2.格里菲思实验
(1)实验过程及现象:
(2)结论:无毒性的R型活球菌和被加热杀死的有毒性的S型球菌混合后,有部分无毒性的R型球菌转化为有毒性的S型活球菌,且这种转化是可以遗传的。
3.艾弗里的体外转化实验
(1)实验材料:S型和R型肺炎双球菌。
(2)设计思路:设法将DNA和蛋白质、多糖等物质分开,单独地、直接地去观察它们的作用。
(3)过程:
(4)结论:DNA是使R型球菌产生稳定遗传变化的物质。
二、噬菌体侵染细菌的实验
1.实验材料及方法
(1)T2噬菌体的结构及代谢特点:
(2)实验方法:放射性同位素标记法。
2.实验过程及结论
(1)实验过程:
(2)实验结论:DNA是噬菌体的遗传物质。
三、DNA是主要的遗传物质
1.RNA是某些病毒的遗传物质的相关实验
(1)烟草花叶病毒(TMV)的实验:
①烟草花叶病毒结构:
②实验过程:
③结论:控制烟草花叶病毒性状的物质是RNA,不是蛋白质。
(2)TMV(烟草花叶病毒)与HRV(车前草病毒)的病毒重建实验:
①实验过程:
→重建病毒烟草→HRV的病斑HRV
→重建病毒烟草→TMV的病斑TMV
②结论:控制TMV、HRV性状的物质是RNA而不是蛋白质。
2.人类的探索结论
DNA是主要的遗传物质,因为实验证明绝大多数生物的遗传物质是DNA,只有少部分生物的遗传物质是RNA。
四、DNA的粗提取与鉴定
1.提取DNA
(1)DNA在NaCl溶液中的溶解度,随着NaCl浓度的变化而改变。当NaCl的物质的量浓度为0.14_mol/L时,DNA的溶解度最低。通过改变NaCl溶液的浓度,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
(2)DNA不溶于酒精,细胞中的某些物质可以溶于酒精,据此可进一步提取出含杂质较少的DNA。
2.实验设计
(1)材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血、菜花、洋葱等。
(2)破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加蒸馏水,用玻璃棒搅拌,用纱布过滤,收集滤液。
(3)去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。
(4)DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)使DNA析出。
3.DNA的鉴定
DNA溶解在0.015 mol/L的NaCl溶液中,加入4 mL二苯胺试剂,沸水浴中加热5 min,溶液变成蓝色。
[牛刀小试]
一、肺炎双球菌的转化实验
1.仔细观察并分析肺炎双球菌的转化实验,讨论交流下列问题:
(1)格里菲思的转化实验中有无设计对照实验?若有,则对照组和实验组分别是第几组?怎样设计的?
提示:有对照设计。对照组是第一至三组,分别向健康小鼠体内注射R型活球菌、S型活球菌、加热杀死的S型球菌。实验组是第四组,向健康小鼠体内注射R型活细菌和加热杀死的S型球菌的混合液。
(2)在肺炎双球菌转化实验中,能够证明DNA是遗传物质的最关键的实验设计思路是什么?
提示:将DNA与蛋白质、多糖等其他物质分开,单独地、直接地观察每种物质的作用。
(3)将S型球菌的DNA、蛋白质和多糖等物质分别与R型球菌混合培养,能得到R型活球菌的是哪些组?能得到S型活球菌的是哪些组?
提示:三组均能得到R型活球菌。加入DNA的一组不仅能得到R型活球菌,还能得到少数S型活球菌。
(4)倘若再增加一组实验:DNA+DNA水解酶+R型活球菌,培养基中能否得到S型活球菌?为什么?
提示:不能。因为只有DNA才能使球菌的致病性发生转化,加入DNA水解酶,导致DNA被水解破坏,此时R型球菌将不能转化为S型活球菌。
2.判断正误
(1)格里菲思和艾弗里分别用不同的方法证明DNA是遗传物质。(×)
(2)肺炎双球菌转化实验证明DNA是主要的遗传物质,蛋白质不是遗传物质。(×)
二、T2噬菌体侵染细菌的实验
1.仔细观察教材P图4-,探讨下列有关问题:
(1)实验中为什么选择35S和32P这两种同位素分别对蛋白质和DNA进行标记?能利用14C和15N同位素进行标记吗?试说明理由。
提示:①因为S仅存在于T2噬菌体的蛋白质中,而P主要存在于DNA中,故用35S和32P分别标记蛋白质和DNA。
②不能。因为T2噬菌体的蛋白质和DNA中均含有这两种元素,无法将DNA和蛋白质区分开。
(2)请根据噬菌体的代谢特点,分析能否直接利用分别含放射性同位素35S和32P的培养基培养噬菌体。
提示:不能。因为病毒无细胞结构,其体内缺少完整的独立
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