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人教版高中生物选修一4.3酵母细胞的固定化课件6共35张PPT
刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的 ②将150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移至200ml的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25°C下发酵24h 2、注意事项 ①控制好发酵温度,一般是室温25 °C ②发酵时间可视具体情况而定,一般时间稍长一些,效果明显 ③可用不含酵母的凝胶珠做相同的处理,对照实验结果 (一)观察凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。 (二)观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味 课题成果评价 三、实验操作 — 用固定化酵母进行发酵 〖思考〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖思考〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的? 〖思考〗在利用固定化酶或固定化细胞进行工业生产的过程中,需要无菌操作吗? 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 需要。 二、实验操作——酵母细胞的固定化 (1)酵母细胞的活化: (2)配制CaCl2溶液: (3)配制海藻酸钠溶液: (4)海藻酸钠溶液与 酵母细胞的混合: (5)固定化酵母细胞: CaCl2溶液的作用?所形成的凝胶柱在CaCl2溶液中浸泡的目的? 使胶体聚沉。形成稳定的结构 如何判断固定化酵母细胞是否成功? ---观察凝胶珠的颜色和形状 若凝胶珠颜色过浅,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少 凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试 课题3 酵母细胞的固定化 4、酶制剂特点(看课本P49面) (1)优点 催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域. 实际问题: 1、通常对 等条件非常敏感,容易失活; 2、溶液中的酶很难回收,不能被 ,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能 。 强酸、强碱、高温和有机溶剂 影响产品质量 再次利用 如果你是工程技术人员,领导要你解决这个问题,你怎么办? 固定化酶技术 (一)固定化酶的应用实例 1、高果糖浆 ①生产原料 葡萄糖,葡萄糖是由淀粉转化而来 是以酶法糖化淀粉所得的糖化液,经葡萄糖异构酶的异构作用,将其中一部分葡萄糖异构成果糖,由葡萄糖和果糖而组成的一种混合糖糖浆 ②生产机理 ③生产流程 含淀粉的浆液 α-淀粉酶 糊精 糖化酶 葡萄糖 葡萄糖异构酶 葡萄糖的异构化 42%~45%转化成果糖 果葡糖浆 果糖和葡萄糖分离 葡萄糖再次异构化 反复多次 果糖含量70%~90% 高果糖浆 一、基础知识 (一)固定化酶的应用实例 总结:固定化酶技术的优点: 使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; 固定在载体上的酶可以被反复利用。 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办? 有。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术。 概念:利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术。 水溶性酶 水不溶性载体 水不溶性酶 (固定化酶) 固定化技术 (二)固定化酶技术 (二)、固定化细胞技术 1、概念: 利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间内的技术。 细胞中含有一系列酶,在细胞正常生命活动的过程中,通过代谢产生所需要的代谢产物。 2.将酶或细胞固定化的方法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 将酶(或细胞)相互连接起来 将酶(或细胞)吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 物理吸附法 各类固定化方法的特点比较: 比较项目 吸附法 结合法 交联法 包埋法 物理吸附 .共价键结合 离子键结合 制备难易 易 难 易 较难 较难 固定化程度 弱 强 中等 强 强 活力回收率 较高 低 高 中等 高 载体再生 可能 不可能 可能 不可能 不可能 费用 低 高 低 中等 低 底物专一性 不变 可变 不变 可变 不变 适用性 酶源多 较广 广泛 较广 小分子底物、药用酶 酶和细胞固定方法的选择 ①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 (1)、方法 (2)、原因 ①细胞体积大,酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材
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