黄孢原毛平革菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化.docVIP

黄孢原毛平革菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化 第50卷第11期 2011年6月 湖北农业科学 HubeiAgriculturalSciences Vo1.5ONo.11 Jun..20l1 黄孢原毛平革菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化 王敏一.王颉 (1.衡水学院生命科学系,河北衡水053000;2.河北农业大学食品科技学院,河北保定071001) 摘要:对白腐菌(Phanerochaetechrysosporium)J~木素过氧化物酶的发酵条件进行了研究.在单因素试验 的基础上用正交试验进行X-艺参数的优化.结果表明,木素过氧化物酶的最佳培养条件为培养13d,接 种0.5mL,料液比1:2.5(W/V,g:mL),培养温度25℃,酶活为771U/mL. 关键词:白腐菌Phanerochaetechrysosporium:木素过氧化物酶;正交试验 中图分类号:Q55文献标识码:A文章编号:0439—8114(2011)11-2305—03 OptimizationofProductionofLigninPeroxidasebyPhanerochaetechrysosporium WANGMin一.WANGJie (1.DepartmentofLifeScience,HengshuiUniversity,Hengshui053000,Hebei,China; 2.CollegeofFoodScienceandTechnology,AgriculturalUniversityofHebei,Baoding071001,Hebei,China) Abstract:Theproductioncraftofligninperoxidasebywhite—rotfugiPhanerochaetechrysosporiumwasinvestigated.Onthe basisofsinglefactorexperiments,orthogonalexperimentwasusedfortheoptimizationoffermentationparameters.Theresult indicatedthattheoptimalconditionswere,thetimeofculture,13d;theamountofinoculation,0.5mL;solidtoliquidra— tio,1:25(,g:mL)temperature,25℃;lipactivity,771U/mL. Keywords:white—rotfugiPhanerochaetechrysosporium;Ligninperoxidase;orthogonalexperiment 白腐菌是已知的惟一能在纯系培养中有效地 将木质素降解为CO,和H,O的一类微生物:--2.是迄 今为止最有效,最主要的木质素降解微生物.在自 然界的碳素循环中起着关键作用重要的木素降 解酶有3种,木素过氧化物酶(Ligninperoxidase, LiP,EC.1.11.1.7),锰过氧化物酶(Manganese—depen. dentperoxidase,MnP,EC.1.11.1.7)和漆酶(Laccase. EC.1.10-3.2).LiPs是该酶系的主要成分.在木质素 降解中起关键性作用大多数白腐菌仅产生2种甚 至1种分解木质素的酶j木素降解酶不仅降解木 质素.而且通过催化自由基链式反应.对环境中难 降解有机污染物具有高效,广谱的降解功能故利 用白腐菌处理工业废水,生物制浆,土壤修复等是 目前生物技术应用研究中的热点课题对黄孢原毛 平革菌分泌胞外酶的条件进行优化.旨在对白腐菌 的丁业化应用和生物质的高效利用提供一定的理 论依据 1材料与方法 1.1材料 甜高粱秸秆.于2008年10月取自河北农业大 学标本园.经烘箱干燥后用中药粉碎机粉碎.过40 目筛,备用;黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium).购自中国工业微生物菌种保藏中 心:PDA培养基:去皮马铃薯200g,加水1000mL 煮沸30min,滤去马铃薯,滤液补足至1000mL.葡 萄糖20g,琼脂15g,121~C灭菌15min.主要用于活 化菌种;固态发酵培养基:甜高粱秸秆粉20g,葡萄 糖0-4g,(NH4)2SO40.O6g,水40g,121~C灭菌15 min. 1.2方法 1.2.1不同发酵条件对木质素酶活影响的正交试 验根据单因素试验.确定最佳水平进行正交试 验.因素与水平设计见表1 收稿日期:2010—09—25 基金项目:保定市科技局项目(07N12);河北省科技支撑计划项目 作者简介:王敏(1977一),女,河北景县人,副教授,博士,从事食品加工与安