9型腺相关病毒介导r65核酶基因转染人脐静脉内皮细胞对nfκb信号通路干预的分析 word格式.docxVIP

中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名NF-κBNuclear factor kappa B核因子 κBIκBInhibitor kappa B抑制性 kappa B 蛋白ASAtherosclerosis动脉粥样硬化ox-LDLOxidized low density lipoprotein氧化型低密度脂蛋白FBSFetal bovine serum胎牛血清R65The R65 ribozyme geneR65 核酶基因AVV9Adeno-associated virus serotype 9 vectors9 型腺相关病毒eGFPEnhanced green fluorescent protein增强型绿色荧光蛋白HUVECsHuman umbilical vein endothelial cells人脐静脉内皮细胞HASMCsHuman aortic smooth muscle cells人主动脉平滑肌细胞M199M199 mediumM199 培养基DMEMDulbecco’s modified eagle’s medium细胞培养基SMCMSmooth muscle cell medium平滑肌细胞培养基PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液MOIMultiplicities of infection转染复数PDTCPyrrolidine dithiocarbamate二硫代氨基甲酸吡咯烷TNF-aTumor necrosis factor - alpha肿瘤坏死因子IL-6Interleukin-6白细胞介素-6eNOSEndothelial nitric oxide ribozymes内皮型一氧化氮核酶vWFVon willebrand factor血管性血友病因子ELISAEnzyme-linked immunosorbnent assay酶联接免疫吸附法目录摘要………………………………………………………………………………1ABSTRACT……………………………………………………………………… 3前言………………………………………………………………………………5材料与方法………………………………………………………………………8.主要材料与仪器……………………………………………………………81.1仪器…………………………………………………………………81.2试剂…………………………………………………………………91.3主要试剂配制………………………………………………………9.方法………………………………………………………………………102.1 重组腺相关病毒体外转染效率的测定……………………………… 102.2 内皮细胞体外损伤模型的建立……………………………………… 112.3 rAAV9-eGFP-R65 转染内皮细胞对其增殖和凋亡的影响………… 142.4 rAAV9-eGFP-R65 对 NF-κB 通路的影响…………………………… 152.5 rAAV9-eGFP-R65 转染减轻内皮细胞凋亡的检测………………… 162.6 统计学方法…………………………………………………………… 16结果……………………………………………………………………………… 17讨论……………………………………………………………………………… 31小结……………………………………………………………………………… 40致谢……………………………………………………………………………… 41参考文献………………………………………………………………………… 42综述……………………………………………………………………………… 49攻读硕士学位期间发表的学位论文…………………………………………… 56导师评阅表……………………………………………………………………… 579 型腺相关病毒介导 R65 核酶基因转染人脐静脉内皮细胞对 NF-κB 信号通路干预的研究研究生：翟慧导师：杨毅宁 教授/主任医师摘要目的：以 9 型腺相关病毒（Recombinant Adeno-associated Virus Serotyoe 9, rAAV9） 为载体介导 R65 核酶基因重组成 rAAV9-eGFP-R65 转染人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVECs），观察是否能抑制氧化型低密度脂蛋白（Oxidized Low Density Lipoprotein，ox-LDL）诱导的 HUVECs 细胞 NF-κB 通路的 激活，进而减轻细胞炎症反应和细胞凋亡。方法：传代培养 HUVECs，用 rAAV9 转 染 HUVECs 细胞，流式细胞仪测定