吡喹酮新衍生物抗日本血吸虫生物学效应研究-病原生物学专业论文 word格式.docxVIP

方法：小鼠感染日本血吸虫尾蚴后，在虫体发育的不同阶段（1d，3d，7d，14d，21d，28d）以 200mg/kg/只的剂量及在感染后第 14 天以不同剂量经灌胃连 续给药 5d，停药后 21d 解剖小鼠计算减虫率。进一步于成虫期（28d）经灌胃连 续给药 5d 杀虫，分别于停药后第 1d，3d，7d 取虫，SEM 观察 P96 对体内虫体的 损伤作用。结果：成虫期与童虫期经 PZQ 衍生物 P96 作用后检获虫数与对照组相比，显 著减少（P0.05）。其中成虫期（28d）P96 组减虫率(53.6%)与 PZQ 组(67.1%)相 近（P0.05），童虫期（14d）P96 组减虫率（58.2%）显著高于 PZQ 组（19.9%， P0.05），尤其在童虫期 1d、3d、7d、14d、21d 的减虫率为 43.5%~58.2%，均显 著高于 PZQ 组（5.9%~45.0%，P0.05）。P96 对体内成虫用药后 1d、3d、7d SEM 观察显示虫体皮层及抱雌沟内壁严重受损结论：PZQ 衍生物 P96 体内具有显著抗日本血吸虫成虫与童虫的作用，其体 内抗日本血吸虫成虫作用与 PZQ 相仿，体内抗日本血吸虫童虫作用则明显优于 PZQ，并存在明显的剂量依赖效应第三部分 钙通道阻滞剂与肌动蛋白解聚剂对 P96 体外抗日本血吸 虫效应的影响目的：通过观察钙通道阻滞剂(calcium channel blockers，CCBs)与细胞松弛素-D(cytochalasin D，CyD)对P96体外抗日本血吸虫活性的拮抗作用，探讨PZQ衍生 物对血吸虫的药物作用靶点及其机制。方法：在单性日本血吸虫尾蚴感染小鼠6w后，将采用肝门静脉灌注法收集雄 性成虫分别与CCBs及CyD预孵育lh，然后加入临界致死浓度的P96与虫体孵育过 夜(16h)，次日用无菌生理盐水洗涤虫体3次，换至新鲜培养液继续培养虫体72h， 每天置于体视显微镜下观察并记录虫体活力，收集第72h 虫体作SEM观察。结果：钙通道阻滞剂尼非地平和尼群地平及CyD对P96抗日本血吸虫的拮抗 效应均较弱， CCBs或CyD预孵育对P96的抗虫作用基本无影响。结论：钙通道阻滞剂尼非地平和CyD可特异性地抑制肌动蛋白与微丝有关的细胞骨架，干扰细胞膜离子通道（如Ca2+通道）的一些相关功能，可拮抗PZQ的 杀虫效应。本实验结果表明，CCBs和CyD无明显拮抗P96抗血吸虫效应，提示P96 的对血吸虫的药物作用靶点及其机制可能与PZQ不同，其杀虫效应与细胞Ca2+内 稳态的变化相关性较小。关键词：日本血吸虫；PZQ衍生物；钙通道阻滞剂；细胞松弛素-D作者：孙 缓指导老师：夏超明 教授Study of anti-schistosomal effect of Praziquantel new derivativesAbstractPart 1 Praziquantel (PZQ) derivatives and PZQ racemate exhibit activity against Schistosoma japonicum in vitroObjective: To observe the impact of 17 kinds of DW series and 32 kinds of YCH- II-P Series PZQ derivatives and 2 kinds of PZQ racemic upon juvenile and adult worms of Schistosoma japonicum (S.japonicum) in vitro.Method: After infection with S.japonicum single-sex cercariae six weeks or seventeen days，worms were collected by portal vein perfusion from ICR mice andcultivated in DMEM medium contain different concentrations of drugs for l6 hours．Then the parasites were washed 3 times and soaked in drug-free medium foranother 72 hours, observed under stereo-microscopy each day and by scanning electron microscope(SEM).Results: In vitro test, DW-3-15 insecticidal effect is strongest in