第四讲 DNA分子的酶切演示教学.pptxVIP

植物基因工程原理与技术;第二讲;;;基因工程工具酶;工具酶;;;核酸酶分类;核酸外切酶与内切酶;核酸酶切割方式;限制性内切酶切割DNA的机制;3亚基组成。 多功能：内切酶、甲基化酶、ATP酶、DNA解旋酶。 识别和结合于特定的DNA序列位点， 随机切断在识别位点以外的DNA序列，距识别位点约1000bp 不适用于基因工程。;三类限制性核酸内切酶特性比较;2.3限制性核酸内切酶的命名;限制性核酸内切酶命名示例;2.4Ⅱ型限制性核酸内切酶的基本特性;Ⅱ型限制性核酸内切酶的用途;Ⅱ型限制性核酸内切酶的识别序列;Ⅱ型限制性核酸内切酶的识别序列;Ⅱ型限制性核酸内切酶的识别序列;Ⅱ型限制性核酸内切酶的切割方式;酶切产生平头末端;酶切产生5’突出黏性末端;酶切产生3’突出黏性末端;限制性内切酶切割DNA的结构机制;常用的部分限制性内切酶;练习：质粒DNA酶切;两种特殊的限制酶;常见同裂酶列表;同尾酶切割后连接;常见同尾酶列表;2.5II型限制性核酸内切酶反应的条件;限制性内切酶单位;;示例：反应体系配制;酶切反应终止;完全酶切;部分酶切;2.6影响限制性核酸内切酶活性的因素;2.6影响限制性核酸内切酶活性的因素;因 素;FastDigest快速限制性内切酶;本讲小结;思考题