第五章节 真核生物基因表达的调控.ppt

第五章 真核生物基因表达的调控;第一节 真核细胞的基因结构;基因家族;The eukaryotic ribosomal DNA repeating unit.;果蝇;血红蛋白基因家族;三、真核基因的断裂结构;断裂基因——外显子与内含子;外显子与内含子的可变性——不同外显子的使用产生不同蛋白质;外显子与内含子的连接区：;四、真核生物DNA水平的调控;1、染色质结构对转录的影响;Nucleosomes in chromatin structure. (A) the core nucleosome particle; (B) 10-nm nucleosome array, (beads on a string); (C) 30-nm solenoid;;;DNase Ⅰhypersensitive sites in the maize Adh1 promoter.;染色体中组蛋白的乙酰化 与去乙酰化控制着染色体的活性;Electron micrograph of rRNA being transcriped.;基因扩增：P247;The eukaryotic ribosomal DNA repeating unit.;基因重排与变换;免疫球蛋白由两条重链（可变区V、连接区J、恒定区C）和两条轻链（V、C）组成；;;;;DNA甲基化与基因活性的调控;第二节 顺式作用元件与基因调控;一、启动子（Ⅱ型）及其对转录的影响;structure and organization of a eukaryotic gene;2、真核生物启动子的多元性;真核基因启动子的多元性;RNA pol Ⅰ的启动子;RNA pol Ⅰ启动子起始转录复合物的形成;RNA pol Ⅲ的启动子;RNA pol Ⅲ启动子与转录起始因子起始转录;3、增强子及其对转录的影响：P257;A gene enhancer element can function in gene regulation at a distance. ;第三节 反式作用因子（转录因子）对转录的影响;一、转录因子的类型;;TF Ⅱ D的一个亚基是特异识别TATA框的，称为TATA框结合蛋白（TBP）；其余亚基叫TBP-相关因子（TAF）； 起始复合物的组装过程： TF Ⅱ D（TBP、TAFs）+DNA+ TF Ⅱ A+ TF Ⅱ B+ （TF Ⅱ F+ RNA pol Ⅱ ）+ TF Ⅱ E;RNA pol Ⅱ的上游元件及其转录因子;RNA pol Ⅱ的上游元件及其转录因子;二、转录因子的DNA结合结构域;Three major categories of transcription factor peotein;1、锌指：P301;;糖皮质激素特异性;2、亮氨酸“拉链”式二聚体 P303;; 3、螺旋-环-螺旋结构（helix-loop-helix，HLH）;; bHLH蛋白是以二聚体与DNA结合并发挥作用的。一个同二聚体或一个异二聚体的两个亚基都有碱性区时才能与DNA结合。HLH结构域的作用大概是正确安置这两个(由每个亚基提供一个)碱性区的位置。;4、结合相关靶DNA的同源域蛋白：P304;;;图示果蝇engrailed基因??物的同源异型域与DNA结合的模式图。从图中可以看出，螺旋3结合在DNA的大沟中，它是蛋白质和DNA的主要接触部位。螺旋3的一些部位与磷酸骨架结合，这是没有特异性的。但中间部分则与碱基相结合，这种结合规定着特异性。螺旋2和螺旋3形成螺旋—转角—螺旋式样，螺旋1和螺旋2为反平行样式，它们与螺旋3近于垂直。此外，在结构域N端有个伸展的臂，它伸入到小沟中，成为蛋白质与DNA的另一个接触位点。;5、类固醇受体（steroid receptor）;;;三、转录活化结构域：P306;特异转录因子：P325;金属硫蛋白基因的多重调控机制;五、真核基因转录调控的主要模式;;;2、蛋白质磷酸化在信号传导中的作用;;3、跨膜信号转导途径;离子通道;4、蛋白激酶的种类与功能;根据作用底物可分为三类： 丝氨酸/苏氨酸型 酪氨酸型 双重底物特异性蛋白激酶 既可使丝/苏氨酸磷酸化又可使酪氨酸磷酸化。;（1）受cAMP调控的A激酶 ? 依赖于cAMP的蛋白酶称为A激酶（PKA） ? PKA全酶由4个亚基组成(R2C2） C亚基具有催化活性，R亚基具有调节功能，R亚基对C亚基具有抑制作用 ? 全酶（R2C2）无催化活性。 ? R亚基与cAMP结合导致C亚基解离表现出活性。;;;（2） 受Ca2+调控的C激酶 C激酶（PKC）是依赖于Ca2+的蛋白质激酶。IP3（肌醇三磷酸）引起细胞质Ca2+浓度升高，C激酶被DAG（二酰基甘油）和Ca2+的双重影响所激