四环素土霉素.PPT

四、紫外-可见分光光度法 1．酸水解法（铜盐法） 青霉素族分子的β-内酰胺环无紫外吸收，而其在弱酸性下的降解产物青霉烯酸在320～360nm处有强烈吸收，但此水解产物不稳定，可加Cu2+，与青霉烯酸形成较稳定的螯合物，在320nm波长处有最大吸收。 2、硫酸汞盐法 　青霉素族抗生素在咪唑的催化下与氯化高汞能定量反应生成相应的青霉烯酸硫醇汞盐，在324～345nm波长范围内有最大吸收。如氯唑西林钠胶囊的含量测定。 五、高效液相色谱法： 高效液相色谱法能较好地分离供试品中可能存在的降解产物、未除尽的原料及中间体等杂质而准确定量。具有快速、高效、灵敏、选择性强、重现性好等特点。各国近版药典应用本法测定的β-内酰胺类抗生素数目越来越多。 《中国药典》大量应用了该法测定抗生素原料药和制剂的含量。 第三节 氨基糖苷类抗生素的分析 本类抗生素的化学结构都是以碱性环已多元醇为苷 元，与氨基糖缩合而成的苷，故称为氨基糖苷类抗生素。 本类抗生素主要有链霉素、庆大霉素、卡那霉素、硫酸 阿米卡星、新霉素等。 一、结构和性质： 1、 链霉素： a.结构： 链霉素（streptomycin）是由链霉胍（streptidine）、链霉糖（streptose）和N-甲基-L-葡萄糖胺（N-methyl-L-glucosamine）以糖苷键彼此相连结合而成的苷。 b.性质： i)溶解性： ii)水解性： iii)氧化还原性： c.鉴别试验： i)茚三酮反应 本类抗生素为氨基糖苷结构，具有羟基胺类和α-氨基酸的性质，可与茚三酮缩合成蓝紫色化合物。中国药典采用本法鉴别硫酸核糖霉素、硫酸庆大霉素。其反应原理如下： ＋ ii)、N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应） 本类药物经水解，产生葡萄糖胺衍生物，例链霉素中的N-甲基葡萄糖胺，硫酸新霉素、硫酸巴龙霉素中的D-葡萄糖胺，在碱性溶液中与乙酰丙酮缩合成吡咯衍生物（I），与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液（Ehrlich试剂）反应，生成樱桃红色缩合物（II）。 I II iii)、麦芽酚（Maltol）反应 此为链霉素的特征反应，链霉素在碱性溶液中，链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N-甲基葡萄糖胺，再消除链霉胍生成麦芽酚（α-甲基-β羟基-γ-吡喃酮），麦芽酚可与铁离子在微酸性溶液中形成紫红色配位化合物。反应原理如下 ： iv).坂口（Sakaguchi）反应 此为链霉素水解产物链霉胍的特有反应。本品水溶液加氢氧化钠试液，水解生成链霉胍。链霉胍和8-羟基喹啉（或α-萘酚）分别同次溴酸钠反应，其各自产物再相互作用生成橙红色化合物。 v)硫酸盐反应： vi)TLC: C.杂质检查： 链霉素中链霉素B的检查（采用TLC) 链霉素B是指甘露糖链霉素，它是由链霉素分子中N-甲基葡萄糖胺的C4″位上的羟基连接一个D-甘露糖组成的。链霉素B本身是发酵中由菌种（球形孢子放线菌）产生的，其生物活性仅为链霉素的20%~25%，能被甘露糖链霉素B苷酶水解成甘露糖和链霉素。因此，如果提取、精制不彻底，链霉素中很可能残存活性较低的链霉素B。 d.含量测定： 各国药典仍采用微生物检定法。 2、庆大霉素：庆大霉素（gentamycin）是由绛红糖胺 、脱 氧链霉胺和加洛糖胺缩合而成的苷。 a.结构： * * 第六章第十节 抗生素类药物的分析 1、掌握β－内酰胺类抗生素（青霉素、头孢菌素）的鉴别反应及含量测定的原理、方法。 2、掌握氨基糖苷类抗生素（链霉素、庆大霉素）的鉴别试验及含量测定的原理、方法。 3、熟悉四环素类（四环素、土霉素）、氯霉素类（氯霉 素），大环内酯类（红霉素、罗红霉素、麦迪霉素）抗生素的鉴别试验及含量测定方法。 4、了解磷霉素钠、林可霉素的鉴别反应及含量测定方法。 5、了解青霉素、链霉素、庆大霉素、四环素、红霉素等药物中特殊杂质的检查方法。 学习要点 第一节 概 述 抗生素： 指在低微浓度下可对某些生物的生命活动有特异性抑制作用的化学物质，是目前临床抗感染治疗的重要药物。 抗生素的活性： 以效价单位来表示，即指每毫升或每毫克中含有某 种抗生素的有效成分的多少。 一般常规检查项目： 1、鉴别试验 2、异常毒性试验 3、无菌试验 4、热原试验 5、水分测定 6、溶液澄明度检查 7、溶液酸碱度 8、降压试验 9、含量测定或效价测定 抗生素的效价测定方法主要分为微生物检定法和化学或物理化学测定法。 a、微生物检定法