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提分微课3 “三法”实验探究酶的本质及特性
一、“试剂检测法”鉴定酶的本质
1.设计思路:从酶的化学本质上来讲,绝大多数的酶是蛋白质,少数的酶是RNA。在高中教材中常见的一些酶,如淀粉酶、蛋白酶等,其本质都是蛋白质,所以对酶本质的鉴定常常是变相地考查蛋白质或RNA的鉴定方法。因此,利用双缩脲试剂与蛋白质作用产生紫色反应而RNA与吡罗红染液作用显红色的原理设计鉴定方案即可。
2.设计方案:
1.猪笼草是一种食虫植物,为了验证猪笼草分泌液中有蛋白酶,某学生设计了两组实验,如图所示,在35℃水浴中保温一段时间后,甲、乙试管中加入适量的双缩脲试剂,丙、丁试管中不加任何试剂,下列对实验现象的预测正确的是( )
A.甲和乙中溶液都呈紫色;丙和丁中蛋白块消失
B.甲中溶液呈紫色,乙中溶液不呈紫色;丙中蛋白块消失,丁中蛋白块不消失
C.甲和乙中溶液呈紫色;丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消失
D.甲和乙中溶液都不呈紫色;丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消失
解析:选C 本实验属于验证性实验,因为分泌液中含有蛋白酶,蛋白酶和蛋白液的化学本质都是蛋白质。鉴定蛋白质常用的试剂是双缩脲试剂,呈紫色反应。实验①中的甲和乙试管始终显示紫色,不能形成对照;而实验②改用观察蛋白块的存在情况(丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消失),形成鲜明的对照,说明了猪笼草的分泌液中含有蛋白酶。根据题意分析可知:丁中蛋白块加水,因没有蛋白酶催化分解,不消失,所以A错误。乙中蛋白液在加水后蛋白质不消失,所以能呈紫色,故B错误。甲和乙中溶液都呈紫色,所以D错误。
二、用“对比实验法”探究或验证酶的高效性、专一性及影响酶活性的因素
(1)验证酶的高效性
①设计思路
验证酶高效性的方法是“对比法”,实验变量为不同类型催化剂,因变量为底物的反应速率进行比较。
②设计方案
项目 实验组 对照组 材料 等量的同一种底物 试剂 与底物相对应的“酶溶液”(如生物材料研磨液) 等量的“无机催化剂” 现象 反应速率很快,或反应用时短 反应速率缓慢,或反应用时长 结论 酶具有高效性 (2)酶的专一性的实验探究方法——对比法
①设计思路
常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
②设计方案
项目 方案一 方案二 实验组 对照组 实验组 对照组 材料 同种底物(等量) 与酶相对应的底物 另外一种底物 试剂 与底物相对应的酶 另外一种酶 同一种酶(等量) 现象 发生反应 不发生反应 发生反应 不发生反应 结论 酶具有专一性 酶具有专一性
2.(2018·山西名校联考)现有甲、乙、丙三支试管,先向三支试管内加入2 mL可溶性淀粉溶液,再按下图所示步骤操作,然后分别用斐林试剂检验。下列分析不正确的是( )
A.甲试管和乙试管对照,说明酶具有专一性
B.甲试管和丙试管对照.说明酶活性受高温影响
C.实验结果是甲试管内会出现砖红色沉淀
D.实验结果是乙试管和丙试管内出现砖红色沉淀
解析:选D 甲与乙对照,底物相同,酶不同,可证明酶的专一性,A正确;甲和丙对照,酶相同,温度不同,可以说明温度影响酶的活性,B正确;甲试管中淀粉在唾液淀粉酶的作用下水解生成还原糖,用斐林试剂检验在水浴加热条件下可以出现砖红色沉淀,C正确;乙试管中胃蛋白酶不能催化淀粉水解,丙试管中唾液淀粉酶失活,两试管中均不出现砖红色沉淀,D错误。
3.(2018·武威一中月考)某同学为了验证酶的相关特性及其作用底物情况进行了三组实验:实验一,某大分子物质甲与酶1混合,可得到中间产物乙;实验二,某大分子物质甲与酶1和酶2混合,可得到小分子物质a;实验三,某大分子物质甲与酶2混合,不能得到中间产物乙及小分子物质a。下列相关推理,错误的是( )
A.小分子a可能是大分子物质甲的基本组成单位
B.酶2的作用底物很可能是中间产物乙
C.由实验一和实验三可得出酶1具有专一性
D.由实验一、实验二和实验三不能得出酶具有高效性和温和性
解析:选C 分析实验一和实验二可知,小分子物质a可能是大分子物质甲的基本组成单位,A正确;结合实验一、实验二和实验三进行分析,酶1的作用底物是大分子物质甲,而酶2的作用底物不是大分子物质甲,酶2的作用底物很可能是中间产物乙,B正确;结合实验一和实验三进行分析可知,酶1的作用底物是大分子物质甲,但未涉及酶1对应的第二种底物,故不能推测酶1具有专一性,C错误;三组实验均未涉及无机催化剂,以及温度和pH等影响酶活性的因素,故不能得出酶具有高效性和温和性的结论,D正确。
1.探究酶的高效性时,对照组应用无机催化剂对照。
2.用不同底物、同种酶来探究酶的专一性时,若是用淀粉酶和淀粉、蔗糖(两种底物),则应用斐林试剂作为检测试剂,不能选用碘液作为检测试剂。
三、用“梯度法
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