分子生物学复习题第八章重组DNA技术.docVIP

第章　重组DNA技术 下列哪项不属于生物工程？ PCR技术重组DNA技术蛋白质工程酶工程细胞工程 重组DNA技术中所用的限制酶是哪类？ Ⅰ型限制酶Ⅱ型限制酶Ⅲ型限制酶Ⅳ型限制酶Ⅴ型限制酶 可以利用蓝白筛选法筛选用pUC转化的重组DNA克隆，是因为pUC包含以下哪种元件？ 复制起点 ampR C.acZ D.多克隆位点MCS调节基因lacI 关于λ噬菌体，以下叙述错误的是基因组DNA的部分序列并非溶原性生长所必需 基因组DNA感染大肠杆菌后形成闭环结构 在溶原性生长时进行滚环复制 复制时形成多联体结构 其转化的细菌经过培养形成噬菌斑 pBR322质粒包含两个抗性基因：氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，据此可以利用哪种方法筛选重组DNA克隆？ α互补 PCR C.插入失活核酸分子杂交蓝白筛选 制备重组DNA首先要制备目的DNA，要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。常用的制备方法不包括 PCR扩增从组织细胞分离基因组DNA化学合成逆转录合成cDNA限制酶截取 第一种应用于临床的重组蛋白是 基因工程疫苗基因工程抗体激素生长因子细胞因子 在重组DNA技术中，目的DNA与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。体外重组的方法不包括： 加人工接头连接加同聚物尾连接互补黏端连接连接平移连接 重组DNA的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。用于制备基因文库的宿主细胞主要是 哺乳动物细胞大肠杆菌酵母枯草杆菌昆虫细胞 哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞？ CaCl2法病毒感染法脂质体载体法显微注射法穿刺法 蓝白筛选属于筛选重组DNA克隆方法的哪种？ PCR分析插入失活分析核酸分子杂交分析酶切分析免疫分析 关于基因文库及其构建，以下叙述错误的是 基因文库包括基因组文库和cDNA文库 构建基因组文库常用的克隆载体是λ噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统 目前构建的cDNA文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列 真核生物cDNA文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物 构建cDNA文库要用到逆转录酶 用目的DNA和质粒制备重组DNA，下列哪些工具酶是必需的？ DNA聚合酶核酸酶连接酶限制酶修饰酶 影响限制酶切割效率的因素有那些？ 底物纯度底物甲基化程度底物结构反应温度反应体系组成 哪些因素会降低限制酶的特异性? 高浓度限制酶 高浓度甘油 低离子强度 用Mn2+取代Mg2+ 高pH值 限制酶的应用非常广泛，包括: DNA重组质粒改造 DNA杂交探针制备基因定位 关于重组DNA技术使用的DNA 连接酶 用以将目的DNA与载体共价连接成重组DNA 包括大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶 大肠杆菌DNA连接酶需要NAD，而T4 DNA连接酶需要ATP 大肠杆菌DNA连接酶用于连接切口或互补黏端 T4 DNA连接酶用于连接互补黏端或平端 重组DNA技术常用的DNA聚合酶有 DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段 Taq DNA聚合酶逆转录酶 T4 DNA聚合酶 载体分为克隆载体和表达载体两类。克隆载体含有以下基本元件 复制起点克隆位点选择标记启动子核糖体结合位点 表达载体的哪些元件是克隆载体不需要的？ 复制起点克隆位点选择标记启动子核糖体结合位点 原核细胞表达载体的表达元件有 核糖体结合位点加尾信号启动子增强子转录终止信号 真核细胞表达载体的哪些表达元件是原核表达载体没有的 核糖体结合位点 加尾信号 启动子 增强子 转录终止信号 以下哪些是真核载体？ 质粒噬菌体酵母人工染色体逆转录病毒腺病毒 以下哪些DNA分子可以通过化学合成法制备？ Cdna PCR引物寡核苷酸探针较小的基因人工接头 将外源DNA导入原核细胞，常用 CaCl2法电穿孔法病毒感染法脂质体载体法显微注射法 以下哪些是真核生物基因在原核细胞内表达存在的问题？ 真核生物基因的启动子不能被原核生物的RNA聚合酶识别 真核生物基因含有内含子，原核细胞没有相应的剪接系统 真核生物mRNA翻译起始位点不能被原核生物核糖体识别 真核生物基因的表达产物往往需要后加工，原核细胞没有相应的加工系统 真核生物基因表达的蛋白质容易被原核细胞的蛋白酶降解。 基因工程药物包括 激素细胞因子生长因子基因工程疫苗基因工程抗体 DNA克隆是从染色体中分离特定DNA片段，与一个DNA载体连接成，将其导入宿主细胞进行复制，并随细胞分裂而扩增，最终得到该特定DNA片段的。 重组DNA技术的核心内容之一是DNA重组，即将与连接成重组DNA。 限制酶是一种内切核酸酶，由细菌产生，能识别双链DNA的位点，并水解该位点内部或附近的键。 DNA重组需要连接酶，常用的DNA连接酶包括DNA连接酶和 DNA连接酶。 载体的化学本质是DNA。载体不但能与重组，能导入，还能利用自身的调控系统，使目的DNA