天然产物化学研究的新思路.pptVIP

用Balb/c-nu裸鼠移植瘤模型，评价BCB挥发油微球的体内抗肿瘤作用。结果表明， BCB挥发油微球与5-氟尿嘧啶注射液、榄香烯注射液均能有效的抑制人肝癌异种移植瘤的生长，其中高剂量组能有效的抑制移植瘤的在裸鼠体内的生长，对瘤生长大小的影响呈现出剂量依赖性，瘤重的抑制率达62.5%对移植瘤的作用强度与已应用于临床的5-氟尿嘧啶（20 mg/ml）对移植瘤的作用强度相当。 BCB 荧光显微镜下观察细胞形态变化 ⅠMCF-7 Ⅱ control group Ⅲ　Hela Ⅳ control group 在脂质体为14.3 ug.mL-1时，形态学变化最为显著，与对照组比较，荧光变得致密，可见凋亡小体，其它浓度未观察到此特征。 DNA琼脂糖凝胶电泳图 VBCB:Ⅰ.DNA marker; Ⅱ. control group; Ⅲ. SMMC－7721; Ⅳ. MCF-7;Ⅴ. K562; Ⅵ. Hela; Ⅶ. Tca 8113 liposome :Ⅰ.DNA marker; Ⅱ. SMMC－7721; Ⅲ. MCF-7; Ⅳ. K562；Ⅴ. Hela；Ⅵ. Tca 8113；Ⅶ. control group 在VBCB 70 ug.mL-1、脂质体14.3 ug.mL-1时，成像图上的DNA“梯状”条带最明显，其它浓度没有显示典型“梯状”条带。 荧光显微镜下细胞形态变化(×200) Ⅰ treated (70ug.mL-1 ) for 72 h Ⅱ control group BCB挥发油诱导细胞凋亡的核酸片段化 ⅠDNA marker Ⅱ control group Ⅲ treated (70 ug.mL-1 ) for 48 h Ⅳ treated (70 ug.mL-1 ) for 72 h BCB挥发油对细胞凋亡及细胞周期的影响 A: control group（ 24 h ） B: treated （24 h） C: control group（ 72 h） D: treated （72 h ） bax和bcl-2蛋白表达(胞质着色) （×200） blank，few nuleolus by staining bax protein， cellular plasma by staining bcl-2 protein， cellular plasma by staining BCB挥发油处理细胞72h后，对照组和处理组Bax、Bcl-2表达直观图 BCB挥发油诱导肿瘤细胞凋亡机制研究 1、 BCB挥发油能够阻止细胞由G1期向S期转变，出现G0/ G1期阻滞 。 2、 BCB挥发油作用于肿瘤细胞后，使促凋亡基因bax值升高，抑凋亡基因bcl-2值变化不明显，bax/ bcl-2比值升高。 3、 BCB挥发油能够抑制人肝癌SMMC－7721细胞的增殖并诱导其凋亡。 G0期的细胞是指暂不分裂的细胞，就是细胞分裂完成时暂时停止分裂，这时就被称为G0细胞。 而G1期是在细胞分裂的间期，细胞分裂间期分为G1期、S期、G2期，G1期主要是合成RNA和蛋白质，S期只要是DNA的合成，G2期主要合成RNA和蛋白质。 荧光显微镜下观察细胞形态变化 Ⅰ MCF-7 Ⅱ control group Ⅶ Hela Ⅷ control group 在KTDA为10 ug.mL-1时，形态学变化最为显著，与未经KTDA处理的细胞核相比，荧光变得致密，可见凋亡小体，其它浓度未观察到此特征。 结论：传统中药物质基础及作用靶点仍然是 天然产物化学的热点课题。 * * * * * 图 2-1. Selaginellin 对Hcy 损伤后β-半乳糖苷酶活性的影响(β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老)。A：Control; B: Hcy (500μM); C: Hcy (500μM)+selaginellin(10-7M); D: Hcy (500μM)+selaginellin(3×10-7M); E: Hcy (500μM)+selaginellin(10-6M); F: DMSO; G: Selaginellin(10-6M) 实验结果也显示，Hcy诱导内皮细胞衰老（β－半乳糖苷酶活性增高与端粒酶活性降低）同时伴有klotho基因表达下调。 * 需氧细胞在代谢过程中产生一系列活性氧簇( reactive oxygen species, ROS)，包括