干细胞生物学（成体干细胞）.pptVIP

成体干细胞 成体干细胞是21世纪初生物学的伟大发现,它改变了干细胞的传统理念 20世纪初，Pappenheim等首次提出了成体干细胞的概念。 在胎儿、儿童和成人组织中存在的多能干细胞统称“成体干细胞（Adult stem cell）”。 2001年斯坦福大学的Blau博士等人对成体干细胞提出了一个全新的概念： 成体干细胞是来自许多不同类型细胞（包括已分化细胞）的一种“状态”，这类细胞不仅存在特定组织中，还可通过血液到达躯体的各个部分，参与各种组织的再生和修复。 类型 1、骨髓干细胞 间充质干细胞 间充质干细胞(mesenchymal stem cell , MSC) 是中胚层分化而成的一种非造血成体干细胞,它在体外贴壁生长,在适当条件下可以大量扩增分化为间充质细胞(mesenchyma cell ,MC) ,即间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells , MPC) 间充质干细胞在体外培养时，可分化为内皮细胞、脂肪细胞、成纤维细胞、软骨细胞、骨细胞、肌肉、血管内皮、成纤维细胞等各种结缔组织细胞等细胞的潜能 造血干细胞 　造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。 造血干细胞表面存在一些标志，可用流式细胞仪和免疫磁性分选技术从骨髓细胞中分离和纯化出HSC。 造血干细胞移植到不同的环境可分化为各种不同类型细胞。 造血细胞发挥功能可相对游离，不需“生物支架”、神经、血管、外科移植等复杂的“下游”工艺，因此便于直接应用于临床。 造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。 3、肝干细胞 1958年Wilson等认为肝组织中存在着干细胞，因为肝组织均有营养损伤和部分切除时再生能力。 肝卵圆细胞能在体外大量增殖，细胞移植后可分化为肝细胞和胆管上皮细胞，表明肝卵圆细胞是肝干细胞。 肝干细胞的可塑性 肝干细胞移植到胰腺和十二指肠时可分化胰腺细胞和肠上皮细胞，表明肝干细胞在适当的微环境中能被诱导分化为内胚层的其他组织细胞。 丁酸钠或二甲亚砜可诱导肝干细胞分化为肝细胞 转化生长因子（TGF-bata）或肝细胞生长因子（HGF）可诱导肝干细胞分化为胆上皮细胞 4、骨骼肌干细胞 肌肉的生长、更新和修复是由肌纤维周围的卫星细胞介导的——即骨骼肌干细胞 骨骼肌干细胞不仅可分化为肌肉，而且可分化为血液细胞成分。具有分化的可塑性 　 成体干细胞生物学特征: ①成体干细胞注入体内后,有明显的趋化性,较明显地集中到受损伤部位; ②成体干细胞到达受损伤部位后,在局部微环境的诱导下,发生明显的诱导分化,使成体干细胞向损伤组织修复所急需的组织细胞分化,从而促进损伤组织的修复。 这个现象,被称为“局部专一诱导性分化”(site－specific differentiation) 成体干细胞横向分化（transdifferentiation）或称为可塑性。 不仅分化为所在组织的细胞，还能跨譜系，甚至跨胚层分化 。 这些细胞可能来源于胚胎发育中停留于各组织的亚全能干细胞，故具有跨胚层分化特点。 三、成体干细胞的鉴定 （1）干细胞的基本特性（包括细胞形态与结构） （2）干细胞特有的表面标记 （3）生化特性 （4）细胞内特异基因的表达 （5）细胞功能鉴定 （3）脾集落技术 Till和McCulloch建立的脾集落技术的具体方法是： 将小鼠经致死剂量射线照射后，由尾静脉输入适当数量的正常同系小鼠造血细胞。若干天后(8-9天)，在受体小鼠的脾脏中生成由造血细胞形成的脾集落，通过对脾集落中的细胞成分及功能等研究来推测造血干细胞的性能。  Till和McCulloch建立的脾集落技术 脾集落生成细胞：生成脾集落的原始细胞。 脾集落大多是由红系、粒系、巨核系细胞或三者混合组成。 人们一般利用一些具有细胞遗传标志的造血干细胞来生成脾集落，根据脾集落遗传标志的情况来研究造血干细胞的性能。 （5）用动物体内实验来验证人类造血干细胞高度自我更新和长期造血重建方法 主要包括： ①造血干细胞羊胎内移植； ②重症联合免疫缺陷病(SCID)或免疫缺陷(HID)小鼠体内移植； 2.骨髓间充质干细胞 间充质干细胞（MSC）能向软骨、骨、脂肪、造血基质和神经原样等细胞分化。首选为组织工程中的种子细胞。 MSC主要来源于骨髓，还可来源于脂肪组织吸取物（PLA） 细胞排列紧密， 呈漩涡状[图（A）]。 细胞形态多样, 类似成纤维细胞, 呈异质性， 以长的梭形细胞为主， 也有三角形、多角形和星形细胞， 伸出长短不一、粗细不均的胞质突起。 传代后，