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第九章 生物技术在园林植物遗传改良上的应用 现代生物技术及其基本概念 (一)生物技术概念 生物技术(Biotechnology),有时也称生物工程(Bioengineering), 是指人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类产出所需产品。生物技术是一门综合性学科。现代生物技术已成功地应用于植物育种中。 (二)生物技术的种类 基因工程(Gene Engineering) 细胞工程(Cell Engineering ) 酶工程(Enzyme Engineering ) 发酵工程(Fermentation Engineering ) 蛋白质工程(Protein Engineering ) (三)细胞工程 细胞工程就是在细胞水平研究开发、利用各类细胞的工程。亦即人们根据科学设计改变细胞的遗传基础,通过无菌操作,大量培养细胞、组织乃至完整个体的技术。 (四)克隆概念 分离基因的技术; 扩增基因的技术; 将单一细胞扩增成细胞群体的技术; 将一个生命体复制成一个与之完全相同的新个体的过程; 将单一个体扩增成一个遗传上完全相同的群体。 一个遗传上来源完全相同的生物群体。 第一节 组织培养 植物组织培养技术是现代植物生物技术的基本技术。 一、植物组织培养的概念与内容 植物组织培养 (plant tissue culture):是指在无菌条件下,将离体的植物材料(器官、组织、细胞以及原生质体等)培养在人工配制的培养基上,在适宜的光照和温度条件下,使其再生,形成完整植株或生产具有经济价值的其他生物产品的一种技术。 广义的植物组织培养即植物离体培养(plant in vitro culture),不仅包括分生组织、输导组织、薄壁组织等离体组织的培养,而且包括原生质体,悬浮细胞,根、茎、叶、花、果实,以及成熟和未成熟的胚胎及至完整植株等的离体培养。 外植体(explant):由植物体上切下来用于离体培养的离体材料,包括任何植物的任何一部分活的组织,包括细胞、组织和器官。 继代培养(subculture):由最初的外植体上新增殖的组织,继续转入新的培养基上进行培养的过程。 单细胞无性系:指在细胞培养中,由单细胞形成的无性系。 愈伤组织(callus):在组织培养过程中,由外植体形成的一团无特定结构和功能的细胞团。 胚状体(embryo):在组织培养过程中,由外植体或愈伤组织产生的,与正常受精卵发育方式类似的胚胎结构体。 植物组织培养的类型 根据培养材料的来源、特性及其应用,植物组织培养主要包括以下几个方面: 植株培养 离体器官培养 茎尖培养 胚乳培养 胚培养 细胞培养 胚珠和子房培养 原生质体培养 花药与花粉培养 离体授粉受精 1、植株培养(plant culture) 指对幼苗和较大的完整植株的培养,主要用于提供适合接种的外植体或是研究植株在某些培养基上的反应等。 通常可分为:扦插苗培养和种子苗培养等类型。 2、茎尖培养(shoot-tip culture) 指对植物茎尖分生组织或更大的芽在离体条件下进行培养,进而获得完整植株的过程。 根据培养目的和外植体的取材大小,分为普通茎尖培养(shoot culture)和茎尖分生组织培养(apical meristem culture)。 3、胚培养(embryo culture) 指将受精后形成的胚从胚珠或种子中剥离出来,置于一定的培养基上生长发育成完整植株的过程。 它包括未成熟胚、成熟胚以及杂种胚的离体培养。 4、胚珠和子房培养(ovule and ovary culture) 将植物的离体胚珠或子房接种到一定的培养基上进行培养,最终获得成熟种子或完整植株的过程。 根据授粉情况,可分为已授粉胚珠与子房的培养和未授粉胚珠与子房的培养。 5、花药与花粉培养(anther and microspore culture) 在离体条件下,对处于一定发育时期的花药或花粉进行培养,使其改变正常的发育方向而形成单倍体植株的过程。 6、离体器官培养(organ culture) 指以植物的某一器官的全部或部分或器官原基作为外植体的离体培养技术。 其材料包括:根尖、茎尖、茎段、茎的切块、叶片、花瓣、花蕾、花托、子房、子叶、以及未成熟的果实等。 7、胚乳培养(endosperm culture) 可培育出三倍体。 8、细胞培养(cell culture) 指以能保持较好分散性的单细胞或很小的细胞团作为外植体的离体培养技术。 根
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