15章 蛋白质合成.pptVIP

二、 转运氨基酸的tRNA 2、肽链的延长 延长因子(EF)包括： ET-Tu、ET-Ts、ET-G 参加的物质： 70S复合物、 氨基酰-tRNA、 EF、GTP、Mg2＋ 过程分三步: 1、进位 2、成肽, 脱落 3、移位 2、 aa-tRNA-Tu-GTP复合物进入A位，GTP水解出Pi, 释出Tu-GDP 3、 Tu-GDP与Ts利用GTP重新合EF-Tu-s. （一）进位 entrance 延长因子EF-T： EF-Tu-Ts（GTPase)、 1、形成aa-tRNA-Tu-GTP复合物，释放EF-Ts，辨认第二个密码子 (二) 成肽 peptide bond formation 2、成肽过程 1、大亚基中的23S rRNA 具有转肽酶活性， （即转肽酶是一种核酶） ⑴ fMet-tRNA的羧基与A位的氨基酸的氨基形成肽键 ⑵ P位蛋氨酸退至A位 ⑶ P位留下无负载的tRNA （三）移位 translocation 原核生物： EF-G（GTP依赖的蛋白，转位酶） 3、阅读方向5’→3‘，成肽方向N 端→C端 4、每延长一个氨基酸消耗2个ATP （进位和移位各1个） 真核生物：EF-2 1、核糖体向mRNA3’端移动相当一个密码子的距离， (GTP供能）， 二肽酰-tRNA移到P位，A位空出。 2、 A位接受新的氨基酸-tRNA进入。 Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP （一）进位(entrance) 肽链延长过程： fMet A U G 5 3 fMet （二）成肽(peptide bond formation) fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP （三）转位（translocation） 在肽链延长阶段： * 核糖体阅读 mRNA密码是5’ 3’， 肽链合成是从N-端 C-端 * 每延长一个氨基酸残基，在进位与移位时各需一个GTP（消耗2个高能磷酸键）；氨基酸活化生成氨基酰-tRNA时，消耗2个高能磷酸键。所以，在蛋白质生物合成过程中每生成一个肽键，需消耗4个高能磷酸键. 总结： * 生成第一个肽键需消耗5个高能磷酸键，因为在翻译起 始阶段消耗1个GTP。 3、肽链的终止和释放 释放因子（Release factor RF) 起终止作用的蛋白因子： 原核生物有3种：RF-1 识别UAA、UAG RF-2 识别UAA、UGA RF3 酯酶的激活剂，酯酶水解 肽-tRNA之间的酯键。 真核生物只有1种RF，具有以上全部功能。 终止密码： UAA、UAG、UGA 1、RF-1或RF-2识别终止密码 2、RF-3激活转肽酶（酯酶），P位上肽与tRNA分离 3、RF-3使tRNA、mRNA及RF从核糖体脱落；IF3使核糖体分离为大小亚基。（衔接下一轮肽链的合成，下一轮核糖体循环） 原核生物肽链终止 多聚核蛋白体的概念 mRNA和多个核蛋白体聚合物称为多聚核蛋白体。 多聚核蛋白体中的各个核蛋白体可在同一时间与同一个mRNA相连； 在一条mRNA上可以同时有多条同样的多肽链在合成，而脱落下来的亚基又可重新投入核蛋白体循环的翻译过程。 同时、高效 三、真核细胞与原核细胞 蛋白质合成的异同 两者合成过程基本相同，但真核细胞更复杂 （一）起始阶段： （二）延长阶段 （三）终止阶段 1、起始因子更多:至少9种 eIF2,GTP结合蛋白 eIF4(A~F): 解旋,帽结合蛋白 eIF5,水解GTP 2、mRNA在众多eIF、帽结合 因子、ATP协助下结合到40S 小亚基上,形成起始复合物前体 3、eIF5(GTP酶)提供能量， 小亚基与大亚基形成80S的起 始复合物。 真核细胞翻译起始过程 真核细胞的起始 多种起始因子(eIF) (帽结合蛋白) 40S 60S AUG Met-tRNAiMet 受位 真核生物 帽结构 Ｐ Ａ Ｅ mRNA GTP Mg2+ 真核生物与原核生物翻译的异同 5’帽子及polyA结构 很少加工即翻译起始 单顺反子，一个起始和终止点 多顺反子，多起始和终止点 帽结合蛋白 SD序列 形成70S起始复合物 met-tRNAimet fmet-tRNAfmet 延长因子EF1?βγ 和 EF2 延长因子(EF-Tu-Ts，EF-G) 释放因子(eRF) 识别 三种终止密码(UAA,UAG, UGA) 真核 原核 起始 延长 终止 三种起始因子 至