蛋白质化学-蛋白质的生物合成.pptVIP

蛋白质的生物合成Protein Biosynthesis，Translation 蛋白质的生物合成，即翻译，就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。也称之为表达(expression)。 蛋白质合成体系Protein Biosynthesis System 参与蛋白质生物合成的物质包括 20种氨基酸(AA)作为原料 酶及众多蛋白因子，如IF、eIF ATP、GTP、无机离子 一、翻译模板mRNA及遗传密码 mRNA是遗传信息的携带者 遗传密码表 1. 连续性(commaless) 2. 简并性(degeneracy) 一个氨基酸有几个不同的密码子的现象叫简并性。 编码同一个氨基酸的一组密码子被称为同义密码子。 3. 通用性(universal)和例外 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 4. 摆动性(wobble) 密码子、反密码子配对的摆动现象 二、rRNA与核蛋白体 1.rRNA 与蛋白质一起构成核糖体——蛋白质合成“工厂” 核蛋白体的组成 三、tRNA与氨基酸的活化 结合氨基酸：一种氨基酸有几种tRNA携带，结合需要ATP供能,氨基酸结合在tRNA3‘-CCA的位置。 反密码子：每种tRNA的反密码子，决定了所带氨基酸能准确的在mRNA上对号入座 。 tRNA与酶结合的模型 氨酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet 蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 氨基酸的活化 翻译的起始 (initiation) 翻译的延长 (elongation) 翻译的终止 (termination ) 二、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 （一）原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； mRNA在小亚基定位结合； 起始氨酰-tRNA的结合； 核蛋白体大亚基结合。 （二）真核生物翻译起始复合物形成 三、肽链合成延长 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：eEF-1 、eEF-2 指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨酰-tRNA进入核蛋白体A位。 （二）成肽 （三）转位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 多聚核糖体 (polysome) 蛋白质合成后加工和输送Posttranslational Processing Protein Transportation 从核糖体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送。 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一序列称为信号序列 。 蛋白质生物合成的干扰和抑制Interference Inhibition of Protein Biosynthesis 二、其他干扰蛋白质生物合成的物质 毒素(toxin) 干扰素(interferon) 白喉毒素(diphtheria toxin)的作用机理 干扰素的作用机理 反义RNA技术 反义技术：将靶基因反向插入重组载体的启动子后面，再导入细胞。过量的反义RNA有效阻止靶顺序的翻译。 反义RNA能阻止一些基因的转录，RNA的加工，或者mRNA的翻译。 此技术常常是任意关闭某些基因的有效方法，例如导入反义RNA来研究基因的调控。 RNAi 技术 1998年2月，Andrew Fire等将单链RNA纯化后注射线虫时发现，基因抑制效应变得十分微弱，而经过纯化的双链RNA却正好相反，能够高效特异性阻断相应基因的表达。将这一现象称为RNA干扰 1984年，抗病毒药物的开发 1988年, 转基因番茄（PG 酶的反义RNA） 延缓成熟的转基因西红柿 ACC， 1-氨基丙环烷羧酸氧化酶， 乙烯合成途径酶类 PG，半乳糖醛酸酶 第一