药品生物检定技术复习课件.pptVIP

药品生物检定技术复习课1 第一章 供试品溶液的配置 1、药品生物检定的概念及“特殊反应”例子 2、标准品分类 3、药品生物检定的任务 4、供试品的配置 生物检定（Bioassay）是利用生物体对药品的特殊反应来测定药品的有效性、安全性和研究药物量效关系。 “特殊反应”---量反应，质反应 ------微生物致死反应测定抗生素 ------小鼠热板法测定镇痛药 标准品分为国际标准品，国家标准品，工作标准品 如：联合国世界卫生组织生物检定委员会，丹麦哥本哈根血清所，伦敦国家医研所 2006年5月4日起EDQM（欧洲药品质量管理局）将取代英国国家生物标准与检定所（NIBSC）的职能，负责WHO抗生素国际标准品的建立、贮藏与分发。 中国国家标准品统一由国家药品生物制品检定所管理。 工作标准品由个企业自行按需要制备。 药品生物检定的任务 药品效价测定---第六、十二、十三章 有害物质检查---第十、十一、十四章 微生物限度检查---第四、八章 无菌检查---第五章 配置操作的注意事项 配置实验器具的灭菌与消毒 固体称量的注意事项 注意点 容量瓶定容的注意事项 检查容量瓶的密闭性 吸管的预洗 移液管尾滴的处理 第六章 抗生素效价的微生物测定 １.解释抗生素概念、了解抗生素的主要作用机制 ２.叙述抗生素的效价和单位及其表示方法 ３.熟知抗生素效价检定操作流程与基本要求 ４.测定原理。 第一节 概述 一、抗生素的概念:抗生素主要是由微生物所产生的极微量便具有选择性地杀死或抑制它种生物或肿瘤、细胞生长的一类天然有机化合物。 二、医药用抗生素的特点具备以下4个特点才能应用到临床。 　(1)有较大的差异毒力 　是由抗生素的作用机制决定的,如青霉素类抗生素能抑制细菌细胞壁的合成，而对人与哺乳动物没有影响,因而该类抗生素具有明显的差异毒力。 　(2)抗菌活性强 抗菌活性的强弱常用最低抑菌浓度(MIC)来衡量，MIC值越小，表示活性越强。 　 (3)抗菌谱广 即指各种抗生素所能抑制或杀灭微生物的范围，范围广谱者称为广谱抗生素，即对多种病原菌都有抑制和杀灭作用；范围窄的为窄谱抗生素，如青霉素主要抑制革兰阳性菌，多粘菌素只能抑制革兰阴性菌，而具有抗肿癌作用的抗生素则称为抗肿瘤抗生素。 　(4)不产生副作用和不良反应 良好的抗生素应对机体无毒性，不引起变态反应，不易使病原菌产生耐药性。 （二）抑菌圈的形成 　　将不锈钢小管(俗称为牛津杯)放置在含敏感试验菌的琼脂培养基上，将抗生素溶液注入小钢管中，抗生素分子随溶剂向培养基内呈球面状放射状扩散。同时将培养基置入适宜试验菌生长的培养箱中，琼脂培养基中的试验菌开始生长。抗生素分子在琼脂培养基中的浓度，随离开小钢管的距离增大而降低，离小钢管愈远，琼脂培养基中抗生素分子愈少，相应的抗生素浓度愈低。当抗生素分子扩散到一定时间，在 小钢管周围形成一个能有效 的抑制试验菌生长的范围， 也就是通常所说的抑菌圈。 抗生素溶液的浓度不同，抑 菌圈的大小亦不同(图4－1)。 按设计原理不同分 　　 第二节 抗生素的效价和单位 一、抗生素的效价和单位 抗生素的含量用效价和单位表示。该词有时不加区别统称为效价单位。 效价（ｐotency）－指检品的实际单位数与其标示量的比值。常表示为效价的百分数。效价是从比较检品与标准品的生物活性而得。在不同的微生物效价测定中，效价计算的公式见后述。 单位（unit,u）单位是衡量抗生素有效成分的具体尺度。各种抗生素的单位含义不同，在习惯上根据它们的实际发展情况而定，抗生素效价单位的具体表示方法见后述。 标准品与国际单位(international unit,iu) 抗生素微生物测定用的标准品，除国内的新品种外，凡已制备国际标准品的品种，在制备国家标准品时，均与国际标准品比较而定出效价。 二、抗生素的效价单位的表示方法 第三节 管碟法测定操作 1. 试验用菌液、缓冲液、培养基的制备按药典规定进行制备。 抗生素效价检定管碟法操作流程 二剂量法 二、影响因素的控制 1．直线斜率的控制　　　斜率小，即抗生素浓度差异小，而抑菌圈的直径差异大，灵敏度的准确性高。 4．培养基的厚度H、试验菌敏感度C、扩散系数D的影响 　　H增大，r缩小；H减小，r增大。C常受加菌量及对抗生素耐药性等因素的影响而有所改变，从而影响r大小。T受细菌生长快慢的影响而引起r改变。D扩散快慢亦可使r改变，因此应注意选用敏感性的试验菌并保持其不变异，特别要防止染菌，制备菌层时含菌浓度要适宜，可采用预试验来确定；向