遗传学 第八章 病毒的遗传分析.pptVIP

第七章 病毒的遗传分析 第一节 病毒的基因组 第二节 噬菌体的突变型 第三节 噬菌体突变型的重组测验 第四节 噬菌体突变型的互补测验 第五节 噬菌体T4 rII的缺失突变与作图 第六节 λ噬菌体的基因组与位点专一重组 病毒（virus）既不属于原核生物，也不属于真核生物，属非细胞型生命形态，又称为分子生物。 其一般特点是： 个体极小：介于20～300 nm之间，能够通过细菌过滤器； 无细胞结构：仅含一种类型的核酸（或DNA或RNA），其主要成分是蛋白质和核酸； 没有完整的酶系和蛋白质合成系统，离体条件下，以无生命的化学大分子状态存在，可形成结晶，不能进行独立的代谢活动； 严格的活细胞内寄生，以复制的方式增殖； 对抗生素不敏感，但对干扰素敏感。 第一节 病毒的形态结构与基因组 通常按宿主类型将病毒分为： 1. 噬菌体（bacteriophage 或phage）：细菌病毒、真菌病毒及藻类病毒 2. 植物病毒(plant virus ): 感染高等植物的病毒 3. 动物病毒(animal virus ): 昆虫病毒和脊椎动物病毒 二、病毒的基因组 已知病毒基因组的结构类型多种多样，基本上可以将其分成6种类型： 双链（ds）DNA病毒基因组 单链 (ss) DNA病毒基因组 正链 (+) RNA病毒基因组 负链 (-) RNA病毒基因组 双链 (ds) RNA病毒基因组 反转录病毒基因组 不同病毒的核酸含量差别较大，通常在1% ～ 50% 。 对每种病毒粒子而言，核酸的长度是一定的，一般由5～ 500 kb组成。 最大的病毒基因组有几百个基因 最小的病毒如M S2噬菌体仅有3个基因 病毒基因组编码的基因一般有： 侵染功能所需的基因，如侵染中的酶； 基因组复制所需的基因，如聚合酶基因； 病毒体形成的基因，如衣壳蛋白基因； 破坏宿主细胞的基因，如溶菌酶基因； 病毒生活周期中任何特殊方面所需的基因，如λ噬菌体基因组与宿主基因组之间的位点专一性重组所需的基因等。 第二节 噬菌体的突变型 噬菌体可利用肉眼可见的性状——噬菌斑来研究。 1） 条件致死突变型 在某些条件（限制条件）下死亡，另一条件（许可条件）下可繁殖，形成噬菌斑。 ① 温度敏感突变（temperature sensitive mutation，ts ）：野生型噬菌体能在很大的温度变化范围内感染宿主并进行繁殖，而热敏感突变型（heat sensitive mutant，hs ） ，通常在30℃ （许可条件）感染宿主进行繁殖，但在40～42℃ （限制条件）就是致死的，不能形成噬菌斑；而冷敏感突变型（cold sensitive mutant，cs）在较低温度下就致死。 ② 抑制因子敏感突变（suppressor sensitive mutation，sus ）： sus 突变的实质是原来正常的密码子变成了终止密码子，因而翻译提前终止，不能形成完整肽链而产生有活性的蛋白质。 带有sus突变的噬菌体在感染带有抑制基因（suppressor，su＋）（许可条件）的宿主菌时能产生子代，但在感染另一种没有抑制基因（su-）（限制条件）的宿主菌时，不能产生子代。野生型噬菌体在这两种宿主中都能产生子代。 2） 噬菌斑形态和宿主范围的突变型 ① 噬菌斑形态突变型　 突变后溶菌速度改变形成与野生型大小不同的噬菌斑（ plaque） 。 快速溶菌突变型: 野生型 r+ ：小噬菌斑； r- ：大噬菌斑。 突变后使感染的细菌全部或是部分被杀死而形成清晰或混浊的噬菌斑。 ② 宿主范围的突变型 突变后感染和裂解菌株改变。 野生型 h+: B菌株 突变型 h-: B菌株和B/2菌株 　 一、T2噬菌体的基因重组与作图 两对基因间的重组（两点测验）： 噬菌斑大小 r+ 正常噬菌体：噬菌斑小而边缘模糊。 r - 快速溶菌突变型：噬菌斑大而边缘清楚。 寄主范围 h+ 噬菌体：只侵染大肠杆菌B株；半透明噬菌斑。 　 h- 突变株：能利用B株和B/2株；透明噬菌斑。 T4噬菌体rII突变型及其检测 不同rII突变型之间的重组测验 1、分离两个不同的（非互补的）rⅡ噬菌体突变型； 2、共感染E.coli B，形成噬菌体的新群体，E.coli B细胞逐渐裂解； 3、收集裂解液，一部分稀释到10－6，感染E.coli B；一部分稀释到10－2，感染E.coli K12 (λ)。 4、观察噬菌斑的数目。