食品中维C的测定.pptVIP

饮料中维生素C的测定;一、测定意义;4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 ;7、水溶性强抗氧化剂，主要作用在体内水溶液中。 8、坚固结缔组织。 9、促进胶原蛋白的合成， 防止牙龈出血。 ;（二）食品中维生素测定的意义;2、 测定食品中的维生素含量在评价食品的营养价值，研究维生素在食品加工、储藏等过程中的稳定性，指导企业指导制定合理的工艺及储存条件，开发利用富含维生素的食品资源等都具有十分重要的意义。;二、原理;2、2，4-二硝基苯肼法的测定原理 维生素C总量包括还原型Vc、脱氢型Vc和二酮古乐糖酸，将样品中的还原型抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，进一步水解为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎。其呈色的强度与二酮古乐糖酸浓度成正比，可以比色定量。 ;三、适用范围;四、仪器与试剂;2、主要试剂 4.5mol ·L-1 ?H2SO4溶液 量取浓H2SO4(分析纯)250mL，慢慢倒入700mL水中，边加边搅拌. 2,4-二硝基苯肼溶液（20g/L) 称取2,4-二硝基苯肼(分析纯)2.00g溶解于100mL 4.5mol·L-1 H2SO4中;10 g·L-1草酸 溶解20g草酸于700ml水中，稀释至1000ml. 20 g·L-1草酸 取500ml草酸溶液（20g/L）稀释至1000ml。 10g/L硫脲溶液 溶解5g硫脲于500ml草酸溶液（10g/L）中。 20g/L硫脲溶液 溶解10g硫脲于500ml草酸溶液（10g/L）中。;1mol/L盐酸 取100ml盐酸加入水中，稀释至1200ml. 标准Vc溶液 称取维生素C(C6H8O5，分析纯) 100mg溶解于100ml10 g·L-1草酸溶液中，此溶液每毫升相当于1mg维生素C。 85%硫酸 慢慢加入900ml硫酸于100ml水中。 ;活性炭 取活性炭100g，加入700mL1mol/L盐酸中，回流1—2小时，过滤，重复用水洗至溶液中无Fe2+离子为止，放在100~120℃烘干。 检验方法：将20g/L亚铁氰化钾于1%盐酸等量混合，将上述滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。;五、实验步骤;呈色反应 （1）取3支试管，各加入4mL经氧化处理的样品稀释液。基中一支试管作为空白，向其余两试管加入1.0mL 2%2,4–二硝基苯肼溶液，将所有试??放入37℃±0.5℃恒温箱或恒温水浴中，保温3h。 ; （2）3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷到室温，然后加入2%2,4–二硝基苯肼溶液1.0mL，在室温中放置10min~15min，后放入冰水内。其余步骤同试样。 ;85%硫酸处理 当试管放入冰水冷却后，向每一试管（连同空白管）中加入85%硫酸5mL，滴加时间至少需要1min，需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色。 ;样品比色测定 用1cm比色皿，以空白液调零点，于500nm波长测定吸光值。 标准曲线绘制 加2g活性炭于50mL标准溶液中，振动1min后过滤。;吸取20.00mL滤液放入1000mL容量瓶中加5.0g硫脲，用1%草酸溶液稀释至刻度。抗坏血酸浓度20μg/mL。 吸取5，10，20，25，30稀释液，分别放放7个100mL容量瓶中，用1%硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的深度分别为1，2，4，5，6μg/mL，为抗坏血酸标准使用液。 ;分别吸取4mL各不同深度的抗坏血酸标准使用液，于6个比色管中，吸取4mL水于试剂空白管，各加入1.0mL 20g/L的2,4–二硝基苯肼溶液，混匀，将全部试管放入37℃±5℃恒温箱或恒温水浴中，保温3h。 ;3h后将8个试管取出，全部放入冰水冷却后，向每一试管中加入5mL 85%硫酸，滴加时间至少需要1min，边加边摇，。将试管自冰水取出，在室温放置30min后，以试剂空白管调零，并比色测定。 以吸光值为纵坐标，抗坏血酸含量（mg）为横坐标绘制标准曲线如下图。 ;六、结果计算;七、注意事项;硫脲可防止抗坏血酸继续氧化，同时促进脎的形成。最后溶液中硫脲的浓度要一致，否则影响测定结果 比色管从冰浴中取出后，因糖类的存在造成显色不稳定，颜色会渐渐加深，30s后影响将减少，故在加入85%硫酸后30s准时比色。