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天美 Techcomp HPLC常见问题处理方法 报告人：李峥 单位：天美（中国）有限公司 每个HPLC使用者应该知道什么 HPLC的原理 HPLC的组成 HPLC的常见故障与处理方法 HPLC Components HPLC 的组成 Pump 泵 Injector/Autosampler 进样器/自动进样器 Column 色谱柱 Detector 检测器 Data System/Integrator 数据系统/工作站 HPLC Pump 泵 Injector/Autosampler进样器/自动进样器 Detector 检测器 Common problems常见问题 A. Pressure 压力 B. Peak shape 峰形 C. Retention 保留时间 D. Baseline 基线 Pressure 压力 1 .没有压力显示，没有流动相流动 2 .压力过高 3 .压力过低 4 .压力不稳 没有压力显示，没有流动相流动 电源问题 → 接通电源，开机开泵 保险丝被烧坏 → 更换保险丝 柱塞杆折断 → 更换柱塞杆 泵头内有空气 → 溶剂脱气、启动泵抽出空气 流动相不足 → 补充流动相 单向阀损坏 → 更换单向阀 漏液 → 拧紧或更换手紧接头 High Pressure Issues压力过高问题 Solutions For Pressure Issues压力过高问题的解决 Low Pressure Issues压力过低问题 原因：压力低于正常值，则体系中存在漏液 解决办法：找到漏液部位，旋紧漏液处螺钮 压力不稳 泵中有气体 → 溶剂脱气或从泵中除去气体 单向阀污染 → 超声清洗单向阀 泵密封损坏 → 更换泵密封 脱气不充分 → 溶剂脱气或改变脱气方法 使用梯度洗脱 → 由于流动相粘度的变化引起 的压力波动 Peak Shape Issues 峰形问题 Split peaks 裂峰 Peak tailing 峰拖尾 Broad peaks 峰变宽 Poor efficiency 低柱效 Peak Tailing, Broadening and Loss of Efficiency峰拖尾、变宽和柱效降低 Column secondary interactions 柱次级效应 Column contamination/void/aging 柱污染/塌陷/老化 Column loading 柱负荷超载 Extra-column effects 柱外效应 Mobile phase viscosity 流动相粘度过大 Solution for the Problem of Peak Tailing峰拖尾问题的解决 Retention Issues保留时间问题 正常的保留时间变化：因改变流速、流动相配比、柱温、柱长及仪器不同而引起的保留时间发生固定的单方向（增加或缩短）的变化 异常的保留时间变化：因色谱柱、流动相、仪器及操作问题引起的保留时间发生不固定的无规律漂移 Cause of retention time change保留时间改变的原因 Column contamination/void/aging 柱污染/塌陷/老化 Insufficient equilibration 不够平衡 Change in mobile phase 流动相变化（挥发或污染） Insufficient buffer capability 缓冲液容量不够 other instrument issues 其他仪器问题 Solution for Retention time change保留时间变化问题的解决 Baseline 基线问题 基线漂移 基线噪音 Drift 基线漂移 Noise 基线噪音 Noise 基线噪音 附录 关于7725i手动进样器 附录 关于7725i手动进样器 冲洗进样器 在进样时，用1毫升流动相冲洗针道，使用如图所示的针道清洗器。这时，用泵冲洗样品环。 注意：为了避免液体从后面喷射出来，要缓慢的注射。 附录 关于7725i手动进样器 7725i的进样方式 完全填充定量环法（常用） 部分填充定量环法（常用） 吸力载入法（极不常用） 附录 关于7725i手动进样器 完全填充环的步骤：