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dystrophin utrophin和nnos在不同类型 肌营养不良症中的表达研究word格式论文

学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:日期:年月日Dystrophin、Utrophin 和 nNOS 在不同类型肌营养不良症中 的表达研究硕士研究生:宋长栋导师:刘恒方 教授 郑州大学第五附属医院神经内科郑州大学脑血管病研究所河南郑州450052摘要研究背景在欧盟,肌营养不良症的发病率为 1/2000,病情进展缓慢、致残率高、预 后差,目前尚无有效的治疗手段,有关疾病诊断和治疗方面的研究显得尤为重 要。抗肌萎缩蛋白(dystrophin)对维持肌纤维的结构完整性具有重要作用, dystrophin 基因突变引起 Duchenne 型肌营养不良症(DMD)和 Becker 型肌营养 不良症(BMD)。抗肌萎缩蛋白相关蛋白(utrophin)是 dystrophin 的同源蛋白, 两种蛋白结构高度相似,utrophin 主要在再生肌纤维中表达并维持肌纤维结构的 完整性,在成熟肌纤维中几乎全部被 dystrophin 替代,近年来通过动物实验发现 utrophin 在成熟肌纤维中的表达上调可能减少 DMD 患者肌纤维的损伤。神经元 型一氧化氮合酶(nNOS)能产生一氧化氮(NO)增加骨骼肌运动中的血供,且 在结构上与 dystrophin 关系密切相关,nNOS 的异常表达可能与患者的运动不耐 受症状有关。目前国内外关于 dystrophin、utrophin 和 nNOS 在不同类型肌营养 不良症中的表达研究较少,该研究为明确上述 3 种蛋白在不同类型肌营养不良症中的表达情况为肌营养不良症的诊断、分型提供依据,并进一步了解 3 种蛋 白表达与 DMD 患者病情严重程度的关系。目的I探索 dystrophin、utrophin 和 nNOS 在不同类型肌营养不良症中的表达,进一步研究 3 种蛋白的表达水平与 Duchenne 型肌营养不良症(DMD)患者病情严 重程度的关系,及 DMD 患者中 dystrophin、nNOS 和 utrophin 之间的表达关系。方法1. 收集从 2013 年 3 月到 2015 年 5 月来我院就诊并诊断明确的 DMD 26 例、 BMD7 例、肢带型肌营养不良症(LGMD)10 例、面肩肱型肌营养不良症(FSHD) 5 例、远端型肌营养不良症 5 例和强直性肌营养不良症(DM)11 例。收集同时间段行肌肉活检病理结果正常者或急诊外伤患者作为对照组 21 例。利用免疫荧光方法检测 3 种蛋白在肌营养不良症患者和对照组中的表达水平并进行荧光强 度分级,比较组间蛋白的表达水平。2. 收集 DMD 患者病情严重程度指标:Hammersmith 功能运动评分(HFMS), 患者出现下述症状时的年龄:首发运动症状、上下楼梯困难、不能独立行走。 根据 dystrophin、nNOS 的免疫荧光染色将 DMD 患者分为 2 组:完全缺失组和 部分缺失组,根据 utrophin 的免疫荧光染色分为 3 组:正常阴性组、轻度增加组 和明显增加组,比较组间患者病情严重程度指标的差异。3. 用 spearman 秩相关分析 DMD 患者的 dystrophin、utrophin 和 nNOS 表达 的相关性。结果13 种蛋白在不同类型肌营养不良症中的表达与对照组相比,3 种蛋白在 LGMD、FSHD、远端型肌营养不良症和 DM 中 的表达差异均无统计学意义;与对照组和其他类型肌营养不良症相比,DMD 和 BMD 中的 dystrophin 和 nNOS 的表达均减少(P0.002),utrophin 的表达均增 多(P0.002),且 DMD 中 dystrophin 减少较 BMD 严重(P0.002)。2DMD 患者中 3 种蛋白不同表达水平组间患者病情严重程度的分析Dystrophin 和 nNOS 的 2 组间患者病情严重程度指标的差异均无统计学意 义。utrop

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