妇阴舒泡腾片体内外抗真菌滴虫作用研究.docVIP

妇阴舒泡腾片体内外抗真菌滴虫作用研究 【关键词】 ,妇阴舒泡腾片 摘 要: 目的: 观察妇阴舒泡腾片的抗真菌和抗滴虫活性。 方法: 分别将妇阴舒泡腾片剂、浸膏及辅料稀释为不同的浓度，加入白色念珠菌及滴虫培养皿中，并以洁尔阴洗液做对照组，观察不同药物不同浓度对两者的体外抑制作用;将40只小鼠随机分为4组，每组10只，皮内注射白色念珠菌0.3mL造成感染模型，分别将妇阴舒泡腾片、克霉唑软膏及生理盐水涂抹于小鼠背部，观察妇阴舒泡腾片对白色念珠菌的体内抑制作用。 结果: 妇阴舒泡腾片在体内外对近年临床分离的白色念珠菌有较好的抑制作用，改善其皮损状态，并能抑制真菌的生长和存活;妇阴舒泡腾片在体外对临床分离的阴道毛滴虫有抑制其生长和存活的作用。 结论: 妇阴舒泡腾片有明显的抗真菌和抗滴虫作用。 关键词: 妇阴舒泡腾片;抗真菌;抗滴虫 妇阴舒泡腾片由黄柏、大黄、紫草等中药经提取加工精制而成，具有清热解毒、燥湿止带、杀虫止痒、消肿生肌等功效。临床用于治疗湿热蕴结型带下病、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎，疗效满意。为证实其药效，笔者进行了相关药效学实验。 1 材料 1.1 药物 妇阴舒泡腾片、浸膏、辅料，均由山东省中医药研究所提供，批号:950925;洁尔阴洗液，成都恩威世亨制药有限公司生产，批号:950608;克霉唑软膏，内含克霉唑3%，山东济宁第三制药厂生产，批号:8907213。 1.2 菌株 白色念珠菌为山东省卫生防疫站保存菌种。 1.3 培养基 血清肉汤，血琼脂平板，改良肝浸汤（CPLM）培养基。 1.4 虫株 取自临床未经过治疗的典型病例的阴道分泌物，经过反复传代、培养，检定为阴道毛滴虫。 1.5 动物 昆明种小鼠，18～22g，雌雄兼用，由山东医科大学实验动物中心提供，合格证号:鲁动质9701001。 2 方法与结果 2.1 对白色念珠菌的体外抑菌试验开启冻干的保存菌种，分离，增菌后，挑取菌落接种在血清肉汤培养基中，37℃培养24h，取出后用血清肉汤将菌液稀释成10 6 个/mL菌液备用。将妇阴舒泡腾片剂、浸膏及辅料分别用蒸馏水配成1.0g/mL、0.5g/mL、0.5g/mL的液体，作为原液，用血清肉汤采用二倍稀释法设置原液、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16共5个浓度，分置于试管中，每管1mL，然后向各管中加入上述备妥菌液0.1mL，同时设菌液对照管及洁尔阴洗液对照管，于37℃培养18h后，点种血琼脂平板，观察细菌有无生长。对白色念珠菌生长的抑制作用详见表1。 表1 妇阴舒泡腾片对白色念珠菌的体外抑制作用注:-为抑制真菌生长，+为不抑制真菌生长 结果:妇阴舒泡腾片剂、浸膏对白色念珠菌有较强的抑制作用，其最低抑菌浓度均为1∶16，即妇阴舒泡腾片剂对白色念珠菌的最低抑菌剂量为62.5mg/mL，妇阴舒泡腾片药物浸膏对白色念珠菌的最低抑菌剂量为31.25mg/mL，并且抑菌作用优于洁尔阴洗液。 2.2 对白色念珠菌的体内抑菌试验 取体重18～22g小鼠40只，背部两侧脱毛，皮内注射1∶2稀释液的上述白色念珠菌液0.3mL，24h后分为4组，每组10只。给药组分别涂抹（200mg/mL）药液0.2mL、0.3mL（以淀粉调成糊状），阳性对照组涂抹克霉唑软膏50mg/只，空白对照组涂抹生理盐水，每天2次，连续3天，剪开皮肤观察。 体内抑菌结果:空白对照组可见明显脓肿、粘连，皮下充血严重，病损范围为1cm×1cm。给药组（两个剂量组）及克霉唑软膏阳性对照组均无脓肿、粘连现象，个别动物注射部位充血，各组间比较无显著性差异。提示:妇阴舒泡腾片具有体内抑菌作用。 2.3 对白色念珠菌临床分离株MIC 50 、MIC 90 的测定 试验前将传代纯菌接种于MH肉汤培养基中，37℃培养18h，取出作为原菌液，再取MH肉汤培养基把原菌液进行1∶1000稀释，使菌液浓度 达10 6 CFU/mL ［1］ 。将上述浓度的妇阴舒泡腾片、浸膏、辅料液均作为原液，进行二倍稀释，然后用加适量脱纤维羊血的MH琼脂作为稀释液，依次做倍比稀释，共做10个稀释度，倒入平板，凝固后置冰箱内备用。采用平皿二倍稀释法 ［2］ ，用国标株作为质控菌株，采用多点定量种菌法，37℃培养18～25h，观察每株菌的最低抑菌浓度（MIC）结果，绘制其MIC累积百分率分布图，计算每株菌的MIC 50 、MIC 90 。结果见表2。表2 妇阴舒泡腾片对白色念珠菌近期临床分离株的MIC测定从表2可见，妇阴舒泡腾片剂对18株近期临床分离白色念珠菌的MIC 50 为12.25mg/mL、MIC 90 为12.25mg/mL;妇阴舒泡腾片药物浸膏对18株近期临床分离白色念珠菌的MIC 50 为1.48mg/mL、MIC 90 为2.96mg/mL;妇阴舒泡腾片辅料对