甲基莲心碱抗血小板活性及抗血栓作用的分析-analysis on antiplatelet activity and antithrombotic effect of neferine.docx

缩写词表英文缩写英文全称中文名称NefNeferine甲基莲心碱PGE1Prostaglandin E1前列腺素 E1ADPAdenosine 5-diphosphate二磷酸腺苷U466199,11-Dideoxy-11α,9α-epoxymethanoprostagla ndin F2α9,11-二脱氧基-11α,9α-亚甲基环 氧前列腺素 F2αTXA2thromboxane A2血栓素 A2 Adradrenaline,epinephrine肾上腺素ECL enhanced chemiluminescence 增强化学发光 EDTA Ethylene Diamine Tetra-acetic Acid 乙二胺四乙酸 ANOVA analysis of variance 方差分析BSA albumin from bovine serum 牛血清白蛋白SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠PBS phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液AP ammonium persulfate 过硫酸胺Tris 2-amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol 三羟甲基氨基甲烷Acr acrylamide 丙烯酰胺Bic bis-acrylamide 甲叉双丙烯酰胺TBS tris buffer saline Tris 缓冲盐溶液Gly glycine 甘氨酸FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素HRP perxidase(horseradish) 辣根过氧化酶TEMED N,N,N,N-tetramethylethylenediamine N,N,N,N-四甲基乙二胺FITC-CD62 PFluorescein Isothiocyanate Marked Platelet P-selectin异硫氰酸荧光素标记的血小板P-选择素HEPES4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfoni c acid4-羟乙基-呱嗪乙磺酸AktERKprotein kinase Bextracellular regulated protein kinases蛋白激酶 B细胞外调节蛋白激酶PLCγ2Syk GSK-3? JNK eNOS PI3K GAPDH GPVI IP3 DAGαIIbβ3Phospholipase Cγ2tyrosine protein kinase Syk glycogen synthase kinase-3? c-Jun N-terminal kinasesEndothelial nitric oxide synthase 3 Phosphatidyl Inositol 3-kinase glyceraldehyde 3-phosphate glycoprotein VIinositol-1,4,5-trisphosphate diacylglycerolglycoprotein IIb-IIIa磷脂酶 Cγ2 酪氨酸激酶 Syk 糖原合成酶激酶-3? 应激激活蛋白激酶 一氧化氮合酶 3 磷脂酰肌醇 3-激酶3-磷酸甘油醛脱氢酶 糖蛋白 VI1,4,5-三磷酸肌醇 二酰脂甘油 糖蛋白 IIb-IIIa甲基莲心碱抗血小板活性及抗血栓作用的研究博士生： 周雅君导师： 向继洲教授 华中科技大学同济医学院基础医学院药理学系中文摘要第一部分 甲基莲心碱对小鼠血小板的作用及抗血栓作用的研究目的：血小板在形成病理性血栓，引发中风，诱发动脉粥样硬化等心脑血管疾病 过程中发挥着重要作用。本研究旨在观察甲基莲心碱对小鼠血小板的聚集、黏附、解 聚及抗血栓作用的影响。方法：本部分实验下腔静脉抽取小鼠血液，分离出 PRP 或制成洗涤血小板，利用 比浊法测定甲基莲心碱对胶原、凝血酶、ADP 和 U46619 诱导的血小板聚集的抑制作 用，同时也观察甲基莲心碱对胶原、凝血酶、ADP 和 U46619 诱导的已聚集血小板的 解聚作用；由于血小板颗粒释放的量同荧光强度正相关，由此测定甲基莲心碱对胶原、 凝血酶和 U46619 诱导血小板聚集时释放的作用；利用体外血栓实验观察甲基莲心碱 对血小板在体外形成血栓的影响；利用急性肺血栓模型观察甲基莲心碱对小鼠体内血 栓形成的抑制作用。结果：①5min 内，3μM Nef 能抑制胶原、凝血酶、U46619 和 ADP 诱导的血小板聚集，并能使胶原、ADP 和 U46619 诱导的已聚集的血小板解聚；1μM Nef 能完全抑制胶原诱导的血小板聚集，能明显使胶原、ADP 和 U46619 诱导的已