gsaccamppka信号转导通路的表达与氟性骨损伤的关联-the relationship between the expression of gsaccamppka signal transduction pathway and skeletal fluorosis.docx
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gsaccamppka信号转导通路的表达与氟性骨损伤的关联-the relationship between the expression of gsaccamppka signal transduction pathway and skeletal fluorosis
期所占比例较其余各组低(P0.05);1000及4000?mol/LNaF组PI较对照组高,2000?mol/LNaF组较对照低(P0.05)。1000?mol/LNaF组凋亡率较对照组低,2000、4000?mol/LNaF组凋亡率较对照组高(P0.05)。(4)Gs、Gi、AC、PKAmRNA表达检测结果:2000?mol/LNaF组PKA、4000?mol/LNaF组Gs及PKA的mRNA相对表达量较对照组高(P0.05);各实验组Gi与AC基因mRNA相对表达量差异无统计学意义(P0.05)。2.氟化钠对wistar大鼠骨组织中Gs/Gi-AC-cAMP-PKA信号转导通路表达影响。(1)氟中毒动物模型建立指标检测结果:对照组无氟斑牙发生,各剂量NaF染毒组氟斑牙检出率为100%;各剂量NaF染毒组大鼠尿氟、牙氟、骨氟、血清氟浓度均较对照组高(P0.05)。(2)大鼠骨组织氧化损伤指标检测结果:中剂量组大鼠骨组SOD及中、高剂量组CAT、抑制羟自由基能力均较对照组低(P0.05);低剂量大鼠组骨组织GSH-Px高于其余组(P0.05);各剂量组大鼠骨组织PCO高于对照组(P0.05)。各组大鼠骨组织8-OHdG与MDA之间差异无统计学意义。(3)大鼠骨组织Gs、Gi、AC、cAMP及PKA含量在各NaF染毒组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.氟化钠可促进UMR-106细胞ALP活性、增加BGPmRNA表达。2.高浓度氟化钠可影响UMR-106细胞周期,延长G0/G1或S期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。3.高浓度氟化钠可增加UMR-106细胞Gs、PKAmRNA表达。4.成功建立了慢性氟中毒大鼠模型。5.150、250mg/LNaF可能致大鼠骨组织氧化损伤。6.采用ELISA方法检测大鼠骨组织Gi/Gs-AC-cAMP-PKA信号转导通路各因子,未在整体水平观察到表达变化。【关键词】氟骨症;大鼠;大鼠骨肉瘤细胞UMR-106;细胞周期;细胞凋亡;G蛋白信号转导通路IIITheassociationbetweentheexpressionofGs-AC-cAMP-PKAsignaltransductionpathwayandskeletalfluorosisMajor:OccupationalandEnvironmentalHealthPostgraduate:WuYanliSupervisor:ZhangHua/WeiYan[Abstract]Objective:TolaythefoundationforfurtherclarifytheroleofGs-AC-cAMP-PKAsignalingpathwayinskeletalfluorosis,ratosteosarcomacellsUMR-106andWistarratswereusedtoanalyzetheexpressionofeachfactorinthissignaltransductionpathwayinvitroandinvivo.Methods:1.ImpactofNaFonUMR-106cellsphenotypeandexpressionofGs/Gi-AC-cAMP-PKAsignalpathway.UMR-106cellsweretreatedwith0,50,100,500,1000,5000,10000,20000,40000and80000?mol/LNaF.CCK-8assaywereusedtodetectthecellviability.(2)UMR-106cellsweretreatedwith0,1000,2000and4000?mol/LNaF.Flowcytometrywasusedtodeterminethecellcycledistributionandtheapoptosis,disodiumphenylphosphatewasusedtodetectALP,Inthesametime,BGP,Gs,Gi,AC,PKAmRNAexpressionweredetectedbyRT-PCR.2.ImpactofNaFonWistarratsandexpressionofGs/Gi-AC-cAMP-PKAsignalpathwayofbonetissue.48Wistarratsweaned4weekswererandomlydividedinto4groupsaccordingtobodyweight,controlgroup(treatedwithtapwater)and3NaFexposuregroups(treatedwith50,150,250mg/LNaF),6femaleratsand6maler
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