gstp1多态性与儿童急性白血病易感性及hdmtx不良反应的相关性研究-correlation between gst p1 polymorphism and susceptibility to acute leukemia and hd mtx adverse reactions in children.docxVIP

MRmedium risk中危MTHFRmethylene tetrahydrofolate reductase亚甲基四氢叶酸还原酶MTXmethotrexate甲氨蝶呤NCICTCAE,version3.0national cancer institute-common toxicity criteria, version3.0美国国立癌症研究所第三版常规毒性判定标准NRno response未缓解nsSNPnon-synonymous single nucleotidepolymorphisms非同义单核苷酸多态性PRpartial remission部分缓解pSNPsperigenic single nucleotide polymorphisms基因周边单核苷酸多态性 RFLPrestriction fragment length polymorphism限制性片段长度多态性 RT-PCRreverse transcription-polymerase chain reaction 逆转录-聚合酶链式反应 SHMT1serine hydroxymethyl-transferase丝氨酸羟甲基转移酶2GSTP1 多态性与儿童急性白血病易感性及HD-MTX 不良反应的相关性 摘要目的：研究急性白血病（acute leukemia，AL）儿童和正常儿童谷胱甘肽转移酶 P1（glutathione s-transferase pi，GSTP1）基因全编码区单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）的基因型和等位基因分布频率特征，并分析其与儿童 AL、急 性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）、急性髓性细胞白血病（acute myelocytic leukemia，AML）和急性 B 细胞型淋巴细胞白血病（B-cell acute lymphoblastic leukemia，B-ALL）发病易感性的关系。回顾性分析使用大剂量甲氨蝶 呤（high-dose methotrexate，HD-MTX）的 ALL 儿童发生不良反应的情况，并分析 ALL 儿童 GSTP1 多态性与 HD-MTX 不良反应发生的相关性。方法：采用逆转录-聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（reverse transcriptase- polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis，RT-PCR-DGGE）结合 DNA 测序技术，对 121 例正常儿童和 108 例 AL 儿童 GSTP1 全编码区内基因多态性 进行筛查，统计 GSTP1 多态性基因型和等位基因在人群中的分布频率并分析 GSTP1 多态性与儿童 AL 易感性的关系。108 例 AL 组儿童中有 51 例接受 HD-MTX 治疗， 将化疗组儿童按美国国立癌症研究所第三版常规毒性判定标准（NCICTCAE，version 3.0）进行不良反应分类和分级，统计各不良反应发生情况并分析 GSTP1 多态性与 HD-MTX 不良反应间的关系。所有数据均用 SPSS17.0 软件进行处理和分析，采用χ2 检验（chi-square test）比较各组间多态性位点基因型和等位基因分布频率的差异， Logistic 回归分析方法计算 OR 值（odd rations）及 95%CI 值（confidence intervals）用以评估各多态性位点基因型与儿童 AL、ALL、AML 和 B-ALL 发病风险间的关系， 以及与 ALL 儿童使用 HD-MTX 后不良反应间的关系，P0.05 为差异有统计学意义。3结果：1. 本研究 229 例样本 GSTP1 的全编码区内共检测到 3 个已知基因多态性位点， 包括 2 个错义突变 GSTP1 A313G（Ile105Val，rs1695）、G439T（Asp147Tyr，rs4986949） 和 1 个同义突变 T555C（Ser185Ser，rs4891）。并确定三个多态性位点在中国汉族儿 童分布等位基因总频率分别为 16.4%、1.3%和 16.4%。2. 229 例样本中 GSTP1 A313G 多态性位点基因型和等位基因分布频率均符合 Hardy-Weinberg 遗传平衡（P0.05）。在对照组、AL 组、ALL 组、AML 组和 B-ALL 组中 A313G 多态性 G 等位基因频率分别为 14.9%（36/242）、18.1%（39/216）、17.9%（29/162）、20.0%（10/50）和 19.9%（27/136）。GSTP1 A313G 多态性各基因型和 等