外源Ca2+对盐胁迫下甜瓜叶片气孔开度调节.docVIP

外源Ca2+对盐胁迫下甜瓜叶片气孔开度调节 　　摘 要：研究了盐胁迫下甜瓜叶片气孔开度变化及外源Ca2+对甜瓜叶片气孔开度的调节作用。研究结果表明，盐胁迫下甜瓜叶片气孔开度显著增加，此变化是由NaCl促进气孔宽度增加引起的，而其对气孔长度无调节作用。同时，外源Ca2+对盐胁迫下的甜瓜气孔开度的调节也是反映在对气孔宽度的调节上，该调节效应受外界盐胁迫状况的影响。低浓度Ca2+（0.1 mmol/L）会促进盐胁迫诱导的气孔开放，高浓度的Ca2+（10 mmol/L）能抑制盐胁迫诱导的气孔开放，起缓解盐胁迫的作用。 　　关键词：甜瓜叶片；气孔；盐胁迫；外源Ca2+ 　　 全球7%的土壤深受盐渍化的影响，其中包括将近1/3的作物耕地面积。土壤的盐渍化严重降低了作物产量及品质，给农业生产带来很大的损失[1]。盐胁迫最大的为害是植物可利用水的亏缺，而植物散失的水分90%左右是经气孔排出的[2]，因此气孔的运动变化与植物抵抗盐胁迫密切相关。早期研究发现，外源NaCl处理可诱导植物气孔运动[3～4]。 　　 Ca2+是多种信号途径的第二信使[5]，其参与CO2， 水杨酸，脱落酸，过氧化氢诱导的气孔关闭，这些因子都会使得保卫细胞内质体内Ca2+浓度（[Ca2+]cyt）上升[6～10]。若利用EGTA除去胞外Ca2+（[Ca2+]ext），会使得CO2、过氧化氢诱导的[Ca2+]cyt上升现象消失[6，11]。有趣的是，Ca2+还参与气孔开放。蓝光诱导的气孔开放会引起胞质Ca2+浓度的提高，然而，提高胞外Ca2+浓度会抑制蓝光诱导的气孔开放[12]。Ca2+在调节这些生物及非生物胁迫中所扮演的两面角色，使其研究热点经久不衰。近年来， Ca2+与植物耐盐性的关系引起了广泛的关注，越来越多的证据表明，Ca2+能缓解盐胁迫[13～14]，但关于Ca2+在盐胁迫下对植物气孔的调节主要集中在对蚕豆（Vicia faba）及拟南芥（Arabidopsis thaliana）保卫细胞的研究上，而到目前为止关于Ca2+对甜瓜保卫细胞的气孔调节的研究未有报道。甜瓜（Cucumis melo L.）具有喜肥耐盐特性，能适应的临界NaCl浓度达100~150 mmol/L，在0~100 mmol/L浓度内，甜瓜对NaCl胁迫有缓冲、调节、适应能力[15]。因此，本研究以网纹甜瓜（春丽）为试验材料，通过研究其在盐胁迫下的气孔特征变化，及外源Ca2+的调节作用，探讨盐胁迫下Ca2+对甜瓜叶片气孔调节的潜在生理功能，旨在服务于耐盐性作物的生产管理，为改善盐渍土壤的农业生产提供理论参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　 参试品种为网纹甜瓜春丽1号（上海农业科学院园艺所提供）。种子进行简单消毒后，播种于培养土中，放在人工气候箱中培养，甜瓜生长的光／暗周期为12 h／12 h，光照强度为0.2~0.3 mmol?m-2?s-1，昼夜温度分别为（28±2）℃和（20±2）℃，相对湿度在60%左右，生长期间无胁迫。 　　1.2 试验方法 　　 表皮条的生物分析参照Zhang等[16]的方法，取3～4周龄甜瓜苗顶端第3~4片完全展开的叶片，用蒸馏水洗净，撕下表皮，洗去叶肉细胞后，切成 　　5 mm长的表皮条，暗处理3 h诱导气孔关闭。用10 mmol/L MES和10 mmol/L KCl（pH值5.6）开放缓冲液为对照，以缓冲液中加入NaCl（终浓度100，200 mmol/L）为盐胁迫处理，在此基础上施加CaCl2（终浓度0.1，1，10 mmol/L），同时在室温下，光照（0.2~0.3 mmol?m-2?s-1）3 h。每个处理至少用3个表皮条，每个表皮条随机测；每个视野随机取10个气孔器，然后在10×40倍倒置显微镜下用测微尺测定气孔长度、宽度，并计算气孔开口大小（长×宽）。测量气孔器中哑铃形体的长度为气孔长度，垂直于哑铃形体气孔器的最宽值为气孔宽度。 　　1.3 数据处理 　　 利用Excel软件统计平均值和标准误差，并作图，用SAS 9.1统计软件进行方差分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 盐胁迫下甜瓜叶片气孔开度变化 　　 如图1所示，与未处理相比，100，200 mmol/L NaCl处理后，甜瓜叶片气孔开度分别增加了103.25%，50.28%，说明盐胁迫明显促进甜瓜叶片气孔开放。但NaCl胁迫对甜瓜叶片气孔开度的影响，主要表现为对气孔宽度的调节，而对气孔长度无调节作用。 　　2.2 外源Ca2+对盐胁迫下甜瓜叶片气孔开度的调节 　　 盐胁迫下，甜瓜叶片气孔显著受外源Ca2+调节，且调节效应与盐处理浓度有关（图2）。100 mmol/L NaCl胁迫下，低浓度的Ca2+（0.1 mmol/L CaCl2）可有